【摘 要】
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目的采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)建立大鼠糖尿病(Dabetes mellitus,DM)模型,观察给予枸杞多糖(Lyciumbarbarum polysaccharides,LBP)对大鼠糖尿病肾损伤(Diabetic renal injury)的作用及其作用机制。方法雄性SD大鼠连续5天腹腔注射STZ(50mg/kg)柠檬酸缓冲溶液,测定大鼠空腹血糖,当血糖值大于等于1
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目的采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)建立大鼠糖尿病(Dabetes mellitus,DM)模型,观察给予枸杞多糖(Lyciumbarbarum polysaccharides,LBP)对大鼠糖尿病肾损伤(Diabetic renal injury)的作用及其作用机制。方法雄性SD大鼠连续5天腹腔注射STZ(50mg/kg)柠檬酸缓冲溶液,测定大鼠空腹血糖,当血糖值大于等于16.7mmol/L时即为糖尿病大鼠模型。将糖尿病大鼠随机分为三组,每组8只,即:糖尿病(DM)组;LBP(60mg/kg/d)组和LBP(30mg/kg/d)组。另外将8只正常大鼠作为对照(control)组。LBP组大鼠持续灌胃12周,control和DM组大鼠灌胃同体积的水。实验第12周末,收集大鼠24h尿液测定尿蛋白含量,测定肾功能二项(血清肌酐(Serum creatinine,Scr)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)。配制浓度为20%的乌拉坦,按照1g乌拉坦/1kg大鼠体重麻醉大鼠,称取体重。大鼠采用内眦静脉取眼眶血,测量空腹血糖值和血清C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)浓度。采用ELISA法测定大鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量。进行肾脏组织形态学分析。采用试剂盒方法检测肾脏组织中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活性和还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量,测定肾组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量。蛋白印迹方法测定肾脏组织中核因子-кB(NF-кB)亚基p65、细胞间黏附分子(Intercellular cell adhesion molecule,ICAM)-1和MCP-1蛋白表达。结果与Control组相比,注射STZ的大鼠5天后血糖明显升高(≥16.7mmol/L),表明糖尿病大鼠模型建立成功。另外,DM组大鼠血清肌酐、尿素氮和CRP水平均明显增高,肾重/体重比值增加,肾脏组织肾细胞排列紊乱,血清中IL-6和TNF-α含量明显升高,肾脏组织中NF-кB亚基p65、MCP-1和ICAM-1蛋白表达明显增加,肾脏组织中MDA含量明显增加,而GSH含量、GSH-PX活性、CAT活性、SOD活性明显降低。LBP能够剂量依赖性地降低血糖水平,减少血清肌酐、尿素氮和CRP含量,减小肾重/体重比值,改善肾脏组织肾细胞排列紊乱,减少血清中IL-6和TNF-α含量,下调肾脏组织中NF-кB亚基p65、MCP-1和ICAM-1蛋白表达水平,降低肾脏组织中MDA含量,提高肾脏组织中GSH含量、GSH-PX活性、CAT活性和SOD活性。结论LBP可改善糖尿病肾损伤大鼠的血糖水平、肾功能、氧化应激水平、肾脏组织病理病变,说明对肾脏组织具有保护作用。LBP改善糖尿病肾损伤可能与其减轻氧化应激和炎症反应,抑制NF-кB表达有关。
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