【摘 要】
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目的:构建BMP-6启动子pTBlue-3质粒,用此质粒将进一步构建BMP-6启动子荧光素酶报告基因(BMP-6 Promoter Luciferase Report gene,BMP-6 PLR)质粒,然后利用瞬时/稳定转染人的
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目的:构建BMP-6启动子pTBlue-3质粒,用此质粒将进一步构建BMP-6启动子荧光素酶报告基因(BMP-6 Promoter Luciferase Report gene,BMP-6 PLR)质粒,然后利用瞬时/稳定转染人的软骨细胞系,建立一个以荧光素酶表达量来观察BMP-6启动子活性的筛药模型.方法:取正常人外周血,提取白细胞中的基因组DNA,用PCR方法扩增BMP-6启动子,回收、纯化此目的片段,连接入pTBlue-3质粒载体中构建BMP-6启动子pTBlue-3质粒质粒,连接产物转化JM103细菌,提取的质粒DNA用Mlu I、Xho I酶切,回收纯化相插入片段的DNA.对扩增的BMP-6启动子和构建的质粒做酶切图谱和PCR验证.结果:构建了BMP-6启动子pTBlue-3质粒质粒,并经检验证实.
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