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目的:肠道微生物群是心血管疾病(Cardiovascular disease,CVD)甚至心肌梗死(Myocardial infarction,MI)的新参与者和潜在治疗靶点。肠道微生物失调可促进动脉粥样硬化的进展。然而,到目前为止,肠道微生物改变在急性冠脉综合征(Acute coronary syndrome,ACS)患者的发病、病变程度和预后方面的研究尚属空白,国内外均无相关文献报道。本研究收集入选者的临床数据并对其粪便中肠道微生物进行定量分析,探究肠道微生物与ACS患者的发病、病变程度及预后的相关性。方法:在本研究中,入选了从2017年7月至2018年12月于我院CCU住院治疗的ACS患者402名(n=402)及同时期来自体检中心的对照者(Controls,CTR)100名(n=100)。所有入选者收集大便及血液标本,根据细菌的16S r DNA序列设计总菌量、双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、链球菌、幽门螺旋杆菌、肠杆菌科的特异性引物。提取待测粪便标本细菌DNA,进行实时荧光定量PCR反应测定16S r DNA拷贝数,得到不同细菌的菌量。ACS组患者通过冠脉造影结果计算SYNTAX评分,患者住院期间均接受急诊或择期PCI治疗,并对ACS患者进行了30个月的随访,一级终点事件为全因死亡,二级终点事件为主要心血管事件(Major adverse cardiac events,MACE),包括:心源性死亡、再发心肌梗死、再次血运重建、心力衰竭、脑卒中、心绞痛。通过Logistic及Cox回归分析,对肠道微生物与ACS患者的发病、冠脉病变严重程度及预后进行相关性分析。结果:1.肠道微生物与ACS患者发病的关系ACS组共计入选患者402例,年龄64(56,73),男性比例256(63.70%),与对照组无明显差异,ACS患者身体质量指数(BMI)明显高于CTR组[ACS组25.53(24.14,26.77)vs CTR组22.72(20.30,25.15)],高血压、糖尿病的比例高于CTR组[高血压:ACS组65.90%vs CTR组41.00%,p=0.002;糖尿病:ACS组27.30%vs CTR组10.00%,p=0.006]。检查及实验室指标:收缩压:ACS组130.00(120.00,147.25)vs CTR组120.00(103.00,126.5),p<0.001;左室射血分数(LVEF):ACS组53.00(45.00,58.70)vs CTR组65.00(63.00,67.00),p<0.001;高密度脂蛋白(HDL):ACS组1.04(0.85,1.25)vs CTR组1.34(1.10,1.60),p<0.001。ACS组肠道微生物总菌量、乳酸杆菌、大肠杆菌、链球菌、肠杆菌科较CTR组有明显改变[总菌量:ACS组127.10(112.00,137.11)vs CTR组113.36(100.57,125.26),p<0.001;乳酸杆菌:ACS组41.45(21.47,61.92)vs CTR组54.11(35.45,89.13),p=0.007;大肠杆菌:ACS组50.61(34.85,68.94)vs CTR组34.81(23.43,48.35),p<0.001;链球菌:ACS组56.78(40.13,70.18)vs CTR组46.47(37.45,56.35),p=0.006;肠杆菌科:ACS组85.50(65.85,102.81)vs CTR组65.81(42.65,80.13),p<0.001]。1.1单因素Logistic回归分析:以ACS组作为因变量,将ACS组和CTR组有组间差异的参数作为协变量引入Logistic回归方程,结果显示:BMI、高血压、糖尿病、总胆固醇、收缩压、总菌量、大肠杆菌、链球菌、肠杆菌科为ACS患者发病的危险因素;左室射血分数、高密度脂蛋白、乳酸杆菌为ACS患者发病的保护因素。1.2将单因素结果中p值小于0.1的变量纳入多因素Logistic回归分析中,结果显示:BMI[优势比(OR)=1.998,95%可信区间(CI)1.308～3.052,p=0.001]、LVEF(OR=0.664,95%CI 0.534～0.826,p<0.001)、收缩压(OR=1.046,95%CI1.003～1.090,p=0.035)、乳酸杆菌(OR=0.955,95%CI 0.923～0.988,p=0.008)、肠杆菌科(OR=1.071,95%CI 1.024～1.120,p=0.002)是ACS发病的独立预测因素。2.肠道微生物与ACS患者冠脉造影严重程度的关系根据ACS患者的冠脉造影结果评估病变程度,并计算SYNTAX评分,划分SYNTAX评分为低、中、高,其中低:SYNTAX评分<12分50例,中:12≤SYNTAX评分≤36分239例,高:SYNTAX评分>36分113例。[乳酸杆菌菌量:SYNTAX评分(低):52.45(27.56,69.31);SYNTAX评分(中):47.96(30.03,63.96);SYNTAX评分(高):24.58(17.61,45.19)]。2.1单因素Logistic回归分析:以SYNTAX评分分组为因变量,以评分低分组为参考,将三组的差异参数作为协变量引入Logistic回归方程。结果表明:年龄、高血压、CK、CKMB、TNT、BNP是ACS患者病变程度严重的危险因素,男性、LVEF、乳酸杆菌是ACS患者病变程度严重的保护因素。2.2多因素Logistic回归分析:将单因素结果中p值小于0.1的变量纳入多因素Logistic回归分析中,结果显示:SYNTAX评分(高)(以低为参照):年龄(>65)(OR=2.571,95%CI 1.053～6.275,p=0.038)是ACS患者SYNTAX评分的独立预测因素。SYNTAX评分(中)(以低为参照):乳酸杆菌(OR=0.985,95%CI 0.971～0.999,p=0.039);SYNTAX评分(高)(以低为参照):乳酸杆菌(OR=0.953,95%CI 0.935～0.970,p<0.001)为ACS患者SYNTAX评分的独立预测因素,且乳酸杆菌菌量越高,与ACS患者SYNTAX评分的负相关性越强[乳酸杆菌(T3+T4)(以乳酸杆菌T1为参照):OR=0.042,95%CI0.008～0.217,p<0.001]。3.乳酸杆菌与ACS患者c TNT水平的相关性将ACS患者c TNT作为因变量,以c TNT≤0.6ng/ml作为参照,进行Logistic回归分析,结果表明乳酸杆菌与ACS患者心肌损伤标志物c TNT呈明显的负相关,即使在去除了其他混杂因素后,乳酸杆菌也是ACS患者心肌损伤的独立保护因素。c TNT>9.7ng/ml(以c TNT≤0.6ng/ml为参考):[乳酸杆菌(T3+T4)(以乳酸杆菌T1为参照):OR=0.317,95%CI 0.099～0.914,p=0.042]4.肠道微生物与ACS患者临床结局的关系随访时间30个月,一级终点:全因死亡24例(7.10%);二级终点MACE事件共72例(21.30%),其中心源性死亡17例(5.03%),再发心肌梗死11例(3.25%),再次血运重建9例(2.66%),心力衰竭22例(6.51%),卒中7例(2.07%),心绞痛24例(7.10%)。4.1单因素Cox回归分析:以发生终点事件作为因变量,将发生终点事件和未发生终点事件有组间差异的参数作为协变量引入Cox回归方程,结果显示:年龄、心梗史、PCI术后、BMI、收缩压、心率、TNT、BNP、Hcy、CRP、UA、总菌量为全因死亡的发生的危险因素;男性、左室射血分数、乳酸杆菌为全因死亡发生的保护因素。年龄、心梗史、收缩压、BNP、Hcy、CRP为MACE事件发生的危险因素;左室射血分数、乳酸杆菌MACE事件发生的保护因素。4.2将单因素结果中p值小于0.1的变量纳入多因素Cox回归分析中,结果显示:年龄(>65)(HR=4.560,95%CI 2.524～12.644,p<0.001)、心梗史(HR=6.085,95%CI 2.525～14.665,p<0.001)、BNP(HR=1.000,95%CI1.000～1.000,p<0.001)、UA(HR=1.008,95%CI 1.001～1.016,p=0.036)、乳酸杆菌菌量T3+T4(以乳酸杆菌T1为参考)(HR=0.119,95%CI 0.025～0.560,p=0.007)是全因死亡发生的独立预测因素。年龄(>65)(HR=1.917,95%CI 1.133～3.243,p=0.015)、心梗史(HR=2.866,95%CI 1.466～5.596,p=0.002)、PCI术后(HR=2.807,95%CI1.696～9.847,p=0.002)、BNP(HR=1.000,95%CI 1.000～1.000,p=0.031)、乳酸杆菌菌量T3+T4(以T1为参考)(HR=0.207,95%CI 0.098～0.438,p<0.001)是MACE事件发生的独立预测因素。结论:1.本研究证实急性冠脉综合征患者呈现典型的肠道菌群紊乱,ACS患者总菌量较对照组明显增多,大肠杆菌、链球菌、肠杆菌科等致病菌较对照组增多,益生菌乳酸杆菌细菌量较对照组明显减低。2.乳酸杆菌为ACS患者发病、冠脉造影严重程度及30个月内发生全因死亡、MACE事件的独立预测因素。低水平乳酸杆菌与ACS患者的发病、冠脉病变严重狭窄及远期预后不良密切相关。3.本研究为临床ACS患者的防治提供思路。