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前房相关免疫偏离(Anterior chamber associated immune deviation，ACAID)是眼免疫赦免的中心环节，是角膜移植高成功率的重要原因。ACAID的维持有赖于完整的血眼屏障；角膜无血管和局部缺乏淋巴引流以及房水内的免疫抑制因子等多种因素。由于内眼手术不可避免的破坏血眼屏障，改变房水引流途径，因此可能影响ACAID的诱导能力。而且内眼术后角膜并发症需角膜移植的患者不断增多，同时随着显微手术技术的发展，角膜移植同时联合其它内眼手术的术式也在不断开展。因此，通过实验研究明确内眼手术对ACAID的影响，不仅可以使我们进一步认识内眼手术后眼局部免疫微环境的变化，而且对于角膜移植术手术时机的选择，估计预后以及合理术后用药等都有重要意义。本研究对大鼠小梁切除和晶状体玻璃体切除后的ACAID诱导能力进行了动态观察，发现术后早期眼局部失去诱导ACAID的能力，但随着术后时间的延长，ACAID的诱导能力有逐渐恢复的趋势。研究提示内眼手术后ACAID诱导能力可能恢复，因此避免联合手术，择期角膜移植手术可降低术后排斥风险。第一部分青光眼手术对前房相关性免疫偏离影响的实验研究目的：研究大鼠小梁切除术后ACAID诱导能力的变化以及与术后时间的关系。方法：Wistar大鼠50只，右眼为实验眼，建立小梁切除模型后随机分为五组。另外SD大鼠5只，Wistar大鼠1只，提供诱导ACAID所需去上皮角膜片。A组为阴性对照组，在术后1w前房植入Wistar大鼠角膜片；B组为阳性对照组，在术后1w颈部皮下注射SD大鼠脾细胞，前房不植入角膜片；C、D和E组为实验组分别在术后1w、4w和8w前房植入SD大鼠角膜片。B组在颈部皮下注射SD大鼠脾细胞悬液1w后，右耳廓皮下注射SD大鼠脾细胞悬液，诱导迟发性超敏反应(Delayed type hypersensitivity DTH)。其它各组均在前房植入角膜片后2w，右耳廓皮下注射SD大鼠脾细胞悬液，诱导DTH。耳廓膨胀指数反映DTH的发生及程度。同时各组取心脏血，检测血清IL-10及IL-4的浓度，取脾脏检测GATA-3mRNA的水平。通过检测DTH，以及Th2细胞转录因子GATA—3和Th2细胞来源细胞因子IL-10及IL-4，分析机体免疫状态并进而评价ACAID。此外，各组取心脏血和脾脏后，摘除眼球组织病理学观察前房炎症变化。结果：1) DTH的检测。术后C、D和E组均诱发出DTH。2)血清IL-10及IL-4浓度检测。术后三个实验组之间血清IL-10及IL-4浓度差异具有统计学意义(P＜0.001)。其中D组血清IL-10及IL-4浓度明显低于C组和E组。血清IL-10及TL-4浓度呈现随术后短时间内上升，而后下降，并随时间推移再次增高的趋势。3)脾脏组织GATA-3基因的表达。D组和E组脾脏组织中GATA-3基因表达明显上调。4)眼球组织病理学观察。C组前房内可见有渗出及少量的炎性细胞，D组和E组前房内未见明显渗出及炎性细胞。结论：大鼠小梁切除术后暂时失去诱导ACAID的能力。但随术后前房炎症的消退，血清IL-10及IL-4浓度再次增高和脾脏GATA-3基因表达明显上调，表明机体ACAID的诱导能力有逐渐恢复的趋势。第二部分晶状体玻璃体切除术对前房相关性免疫偏离影响的实验研究目的：研究大鼠晶状体和玻璃体切除术后ACAID诱导能力的变化以及与术后时间的关系。方法：Wistar大鼠50只，右眼为实验眼，建立晶状体及玻璃体切除模型后随机分为五组。另外SD大鼠5只，Wistar大鼠1只，提供诱导ACAID所需去上皮角膜片。F组为阴性对照组，在术后1w前房植入Wistar大鼠角膜片；G组为阳性对照组，术后1w颈部皮下注射SD大鼠脾细胞，前房不植入角膜片；H、I和J组为实验组，分别在术后1w、4w和8w前房植入SD大鼠角膜片。G组在颈部皮下注射SD大鼠脾细胞悬液1w后，右耳廓皮下注射SD大鼠脾细胞悬液，诱导迟发性超敏反应(Delayed type hypersensitivity DTH)。其它各实验组均在前房植入角膜片后2w，右耳廓皮下注射SD大鼠脾细胞悬液，诱导DTH。耳廓膨胀数反映DTH的发生及程度。同时各组取房水，检测TGF-β2、IL-10浓度，取心脏血，检测血清IL-10及IL-4的浓度，取脾脏检测GATA-3 mRNA的水平。通过检测DTH，以及Th2细胞转录因子GATA-3和细胞因子TGF-β2，IL-10及IL-4的表达，分析机体免疫状态并进而评价ACAID。此外，各组实验结束时均摘除眼球，组织病理学观察前房炎症变化。结果：1) DTH的检测。术后1w，4w和8w实验组均诱发出DTH。2)房水TGF-β2和IL-10以及血清1L-10及IL-4浓度检测。术后三个实验组之间房水、血清TGF-β2、IL-10及IL-4浓度差异具有统计学意义(P＜0.001)。其中I组TGF-β2、IL-10及IL-4浓度明显低于H组和J组。TGF-β2、IL-10及IL-4浓度呈现随术后短时间内上升，而后下降，并随时间推移再次增高的趋势。3)脾脏组织GATA-3基因的表达。I组和J组脾脏组织中GATA-3基因表达明显上调。4)眼球组织病理学观察。H组和I组前房内可见有渗出及炎性细胞，J组前房内未见明显渗出及炎性细胞。结论：大鼠晶状体玻璃体切除术后暂时失去诱导ACAID的能力。但随术后前房炎症的消退，房水和血清TGF-β2、IL-10及IL-4浓度再次增高和脾脏GATA-3基因表达明显上调，表明机体ACAID的诱导能力有逐渐恢复的趋势。