【摘 要】
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背景:肝癌是最常见的恶性肿瘤,其病理分型分为肝细胞癌、胆管细胞癌、混合类型的癌。其中肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是最常见的,由于该病前期存在的隐匿性,临床症状不明显,常常在病情发展晚期才发现,给治疗带来了很大的困难,导致病人的预后极差。西药在治疗晚期癌症中存在很多的副作用。中药在治疗癌症中具有独特的优势。本课题组长期从事中药治疗肝癌的研究,我们发现中药复方中
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背景:肝癌是最常见的恶性肿瘤,其病理分型分为肝细胞癌、胆管细胞癌、混合类型的癌。其中肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是最常见的,由于该病前期存在的隐匿性,临床症状不明显,常常在病情发展晚期才发现,给治疗带来了很大的困难,导致病人的预后极差。西药在治疗晚期癌症中存在很多的副作用。中药在治疗癌症中具有独特的优势。本课题组长期从事中药治疗肝癌的研究,我们发现中药复方中的预知子有抗肝癌的功效,且预知子中主要活性成分α-常春藤皂苷可以诱导癌症细胞凋亡,但具体机制尚不清楚。目的:本课题将研究α-常春藤皂苷诱导肝癌细胞凋亡作用及其作用机制方法:用α-常春藤皂苷处理肝癌细胞。MTT法检测细胞的增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡率;JC-10荧光探针检测线粒体膜电位的变化;WB检测α-常春藤皂苷上调肝癌细胞凋亡蛋白的级联反应。转录组学对经α-常春藤皂苷处理的肝癌细胞的筛选;WB检测α-常春藤皂苷干预后p53、Noxa蛋白的表达;以及α-常春藤皂苷对p53、Noxa蛋白稳定性的影响;q PCR和WB检测RNA干扰p53、Noxa后对p53、Noxa m RNA和蛋白表达的影响;α-常春藤皂苷对p53、Noxa干扰后细胞增殖和凋亡的影响;线粒体膜电位的影响;以及对凋亡蛋白的影响。结果:α-常春藤皂苷抑制了肝癌细胞的增殖,并诱导了细胞的凋亡。转录组学证实了α-常春藤皂苷处理的肝癌细胞对其凋亡的影响。同时转录组学检测发现Noxa基因PMAIP1、p53基因TP53在α-常春藤皂苷处理的肝癌细胞中呈现高表达。以si RNA干扰后Noxa、p53后m RNA和蛋白的表达降低,同时凋亡率也降低,但给予α-常春藤皂苷处理后增加了Noxa和p53蛋白的表达,同时线粒体膜电位下降,细胞凋亡增加。结论:α-常春藤皂苷通过激活p53,上调Noxa的表达,从而诱导肝癌细胞的凋亡
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