【摘 要】
：
目的:由于血脑屏障及脑内肿瘤免疫抑制性微环境的存在,肺癌脑转移患者预后差,缺乏有效的治疗方法。本研究在放疗产生的微颗粒RT-MPs膜表面设计了仿载脂蛋白A-1的α螺旋状结构的多肽R4F,并搭载USP7抑制剂P5091,旨在通过血脑屏障重编程脑内肿瘤微环境,抑制肺癌脑转移进展,为肺癌脑转移的治疗提供新的理论基础。方法:（1）构建跨膜表达仿ApoA-1的α螺旋状结构的多肽（FAEKFKEAVKDYFA
论文部分内容阅读
目的:由于血脑屏障及脑内肿瘤免疫抑制性微环境的存在,肺癌脑转移患者预后差,缺乏有效的治疗方法。本研究在放疗产生的微颗粒RT-MPs膜表面设计了仿载脂蛋白A-1的α螺旋状结构的多肽R4F,并搭载USP7抑制剂P5091,旨在通过血脑屏障重编程脑内肿瘤微环境,抑制肺癌脑转移进展,为肺癌脑转移的治疗提供新的理论基础。方法:（1）构建跨膜表达仿ApoA-1的α螺旋状结构的多肽（FAEKFKEAVKDYFAKFWD,命名为R4F）的Lewis肺癌细胞系,共聚焦显微成像和流式细胞术检测细胞构建成功。（2）在RT-MPs基础上制备MP-R4F@P5091载药微颗粒,微颗粒扫描电镜和粒径测量进行表征,液相色谱确定放疗微颗粒成功搭载P5091。（3）共聚焦显微成像和流式细胞术验证MP-R4F@P5091靶向及重编程巨噬细胞、小胶质细胞能力。（4）构建Transwell模型检测微颗粒离体跨血脑屏障能力;建立Lewis肺癌脑转移模型,使用小动物活体成像技术观察脑组织内积聚的微颗粒含量。（5）评价动物模型疗效:建立Lewis肺癌脑转移模型,小动物活体成像观察治疗效果,统计小鼠生存率,组织切片行HE和Tunnel染色判断治疗效果。（6）探讨MP-R4F@P5091治疗肺癌脑转移的作用机制:首先用流式对小鼠治疗后的脑部肿瘤微环境进行免疫分析,检测CTL的浸润,以及巨噬细胞的极化;其次多色免疫荧光分析免疫细胞浸润;测序及跑蛋白验证相关通路的活化。结果:成功构建了跨膜表达R4F多肽的Lewis肿瘤细胞系,并通过放疗成功制备包裹P5091的MP-R4F@P5091微颗粒。MP-R4F@P5091成功靶向IL4-BMDM-M2巨噬细胞并将其重编程为M1型。体外Transwell模型证实经R4F修饰的微颗粒较未经修饰的微颗粒更易通过血管内皮细胞进入下室。小动物活体成像证实MP-R4F/MP-R4F@P5091相对于MP富集于脑组织的量明显增多;脑组织免疫荧光显示,MP-R4F@P5091携带的信号可与F4/80阳性细胞共定位。体内试验进一步证实MP-R4F@P5091可延长小鼠生存,促进脑内CD8+T细胞数增加2倍以上。此外,转录组和Western blot结果证实MP-R4F@P5091激活M2巨噬细胞MAPK信号通路。结论:本研究设计了MP-R4F@P5091用来穿透血脑屏障,靶向巨噬细胞及杀死脑转移的Lewis肺癌细胞。体外体内实验均表明MP-R4F@P5091成功跨过血脑屏障以及靶向及重编程巨噬/小胶质细胞,显著延长肺癌脑转移小鼠的生存期。机制上表明MP-R4F@P5091通过MAPK通路将M2巨噬细胞向M1极化,促进抗肿瘤免疫效应。
其他文献
目的:探讨第一阶段射血分数（First-phase ejection fraction,EF1）联合micro RNA-130a在压力负荷诱导的心衰（Heart failure,HF）心肌纤维化中的早期诊断价值。方法:将6周龄SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组和造模组,通过微创主动脉弓缩窄术建立压力负荷诱导的HF模型,超声评估大鼠主动脉弓血流流速和平均压力梯度。术前及术后连续4周每周随机从每组各
目的:复发性流产（Recurrent spontaneous abortion,RSA）是当前辅助生殖领域中较棘手的疾病。本课题组前期针对不明原因RSA患者的蜕膜组织进行了高通量转录组测序,并对测序数据进行了生物信息学分析后发现,生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白34（Growth arrest and DNA damage-inducible protein 34,GADD34）可能是导致不明原因复发
目的:微波消融（Microwave ablation,MWA）作为肝癌局部治疗的方式之一,具有消融范围大、损伤小、恢复快等优点,在临床作为早期肝癌的根治性手段。对于直径大于3cm的肝肿瘤,微波消融存在消融残留和容易复发等问题。对于中晚期肝癌,消融作为综合治疗中的一部分在临床用作减轻患者肿瘤负荷。近年来,消融治疗的免疫效应被越来越多的观察证据证实,这种免疫效应并不局限于局部,还具有全身性和系统性,其
目的:下丘脑被认为是眼压神经性调节中枢所在,前房自主神经末梢在眼压神经性调节环路中发挥终端传出效应,我们前期研究发现下丘脑内多个核团与前房自主神经末梢之间存在传出神经通路,被称为“交感流出道”的下丘脑室旁核（paraventricular hypothalamic nucleus,PVH）是其中之一,然而PVH是否具有调节眼压的功能尚不清楚,本研究拟通过光遗传学技术进行验证。方法:通过脑立体定位方
背景:动脉粥样硬化性心血管疾病（ASCVD）是目前中国死亡原因的首位疾病。虽然存在大量传统危险因素如高血压、高血脂等,但控制效果不佳。近期发现感染与ASCVD亦存在相关性,在中国,慢性幽门螺旋杆菌感染人群众多,前期研究发现慢性幽门螺旋杆菌（HP）感染与动脉粥样硬化疾病相关,但临床试验及荟萃分析的结果各不相同。目的:本研究的目的是通过已发表的所有观察性研究进行荟萃分析来探讨幽门螺旋杆菌感染与动脉粥样
近年来，国家大力发展中医药事业，积极倡导中医药文化进校园活动，在中小学刮起了一阵“中医热”浪潮，丰富了学生课余文化生活，开创了传承和弘扬中医药文化的新局面。为更好地传承中医药文化，坚持文化自信，开阔中小学生视野，培养中小学生懂中医、学中医、爱中医、用中医的思维模式，普及大健康理念，特提出并阐述了中医药文化进校园应明确受众群体特征、抓牢课堂教学主阵地、精心设计载体形式的校园教育融合模式，以促进中医药
文章首先介绍了教育联盟模式下中医药文化进小学的实践，然后论述了教育联盟模式下中医药文化进小学的实践成果反馈机制，最后分析了教育联盟模式下中医药文化进小学的实践意义与存在的不足。
＜正＞综合实践活动作为国家规定的必修课程,以培养学生核心素养为导向、以解决实际问题为抓手,在落实立德树人根本任务、传承中华优秀传统文化方面发挥着重要作用。新时代背景下,长沙高新区内各学校充分认识到综合实践活动文化育人、实践育人的优势,在引导学生关注传统文化、思考现代文化,形成文化自觉、文化自信方面进行了积极探索。一、上下联动,加强传统文化教育政策的引导与落地为确保中华优秀传统文化教育落实到位,
目的可注射水凝胶在心肌梗死治疗方面很有前景;然而,当前研究中多数水凝胶与宿主心肌组织缺乏机电耦合,而且难以监测水凝胶的植入情况,可能会影响疗效。将导电性引入水凝胶以及联合间充质干细胞治心肌梗死有助于解决机电耦合的问题。本研究的目的是构建一种可注射导电温敏水凝胶体系用于治疗心肌梗死,并应用PET分子影像手段进行无创监测。方法将硅酸盐纳米片（silicate nanoplatelets,SNs）与金纳
目的 总结肢体动脉血栓形成患者行血管腔内治疗的护理经验。方法 回顾性分析解放军第九七〇医院2015年3月至2021年3月经腔内治疗的52例肢体动脉血栓形成患者的临床资料，探讨以导管接触溶栓（catheter-directed thrombolysis,CDT）为主的血管腔内治疗围手术期所表现出的护理问题及与之相应的护理措施。结果 本组患者均能耐受腔内手术，手术成功率为94.2%（49/52）,单纯