N-酰基高丝氨酸内酯调控拟南芥抗盐能力及其与GCR2结合特征的研究

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由于全球气候干旱等不利因素,导致全球耕地盐碱化加剧,对农业生产造成严重危害。盐胁迫是一类主要的非生物胁迫,其可抑制植物生长、降低作物产量等。提高植物的抗盐能力一直是研究的重点。土壤中某些非致病的根际菌对植物的生长发育具有积极作用。N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)是革兰氏阴性菌分泌的一类群体感应信号,它能被植物感知并广泛影响植物体内的代谢活动。长链的AHLs可以提高植物的抗病性已得到较为深入的研究。然而,植物如何识别、接受AHLs的分子机制还并不清楚。  本研究在前人的研究成果上,利用微量热泳动和放射性配基法,初步分析了GCR2与3OC6-HSL的结合特征。本实验还以拟南芥为实验材料,从多种AHLs中筛选出具有较强抗盐能力的3OC6-HSL,其对提高拟南芥的抗盐能力及主根生长作用明显。通过分析盐胁迫下3OC6-HSL处理后拟南芥体内生理生化的变化及其分子水平的变化,以弄清3OC6-HSL提高拟南芥抗盐能力的分子机制。本实验得到的主要结果如下:  1.通过MST技术测得3OC6-HSL与GCR2的Kd为76.1±0.515 nM,放射性配基法实验测得3H-3OC6-HSL与GCR2的结合Kd为62.4495±4.2671nM,并且3OC6-HSL与BSA、OVA及热变性的GCR2没有明显结合,并且3OC6-HSL与GCR2的结合是可逆的。初步证明GCR2可能作为3OC6-HSL的受体。  2.本实验发现C4-HSL、3OC6-HSL、C8-HSL、3OC8-HSL和3OC12-HSL具有抗盐能力。其中3OC6-HSL在提高拟南芥抗盐能力及促进主根生长方而具有较强作用。在120mMNaCl胁迫下1μM3OC6-HSL能最大程度的增强拟南芥盐耐受性。在80、100mMNaCl胁迫下,3OC6-HSL能促进种子的萌发。  3.3OC6-HSL可提高拟南芥中叶绿素a的含量,抑制叶绿素b的含量,还可降低拟南芥体内钠离子、钙离子含量,提高钾离子含量。盐胁迫下3OC6-HSL同时处理组的叶绿素a含量高于NaCl处理组。盐胁迫下3OC6-HSL预处理组中,叶绿素a和叶绿素b的含量都高于NaCl处理组。另外,3OC6-HSL可促进气孔关闭。  4.3OC6-HSL能调控GCR2、MPK6、CA M9、JAR1、SOS2和ABA1的表达。3OC6-HSL不能显著促进RD29B、RD22、ERD1、COR15A和ABA1的表达。盐胁迫下,3OC6-HSL同时处理组和预处理组中ABA合成通路的ABA1,及依赖ABA信号的COR15A、RD29B、RD22都显著上调,而不依赖ABA信号通路的ERD1没有明显上调。
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