【摘 要】
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Ri质粒转化技术是植物基因工程的一个重要方面,它与植物化学研究手段的结合,为天然产物的持续开发提供了新的技术路线。 Ri质粒转化发根的生长不依赖植物激素,生长迅速,遗
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Ri质粒转化技术是植物基因工程的一个重要方面,它与植物化学研究手段的结合,为天然产物的持续开发提供了新的技术路线。 Ri质粒转化发根的生长不依赖植物激素,生长迅速,遗传性状稳定。发根一方面能够合成与原植物相同或相似的次生代谢产物;另一方面可以产生原植物不含或含量极微的成分。发根的这些特点使它有可能发展成为天然产物工业化生产或药用植物基因工程的中间载体。 本实验成功地繁殖了番薯、栝楼、决明的无菌试管苗。利用菌种A.rhizogenes4从三种植物的叶片和茎段上诱导出发根,并根据发根生长特点和甘露碱检测确定发根为T-DNA转移的产物。 为优化发根的生长速度和扩大其最终的生物量,本实验着重探讨了影响发根生长的因素,首先是培养基和pH值,不同培养基由于其组成成分和pH值的差异,对发根生长造成的影响也不相同。经过对不同培养基的对比实验,我们发现pH值5.6的MS培养基适合番薯发根的生长和生物量的积累;pH5.8-6.0的1/5MS培养基适合栝楼发根快速增殖;pH5.8—6.0的1/10MS培养基比较适合决明子发根的生长、侧根的产生以及生物量的积累。其次是光照,光照是影响发根生长代谢过程的重要因子,番薯发根在漫射关照条件下更易于积累次生代谢物;光照有利于从固体培养基转移到液体培养基上的决明发根快速增殖,而对于在液体培养基上二次继代决明发根的生长则表现不利。另外我们还比较了培养基中相同浓度的蔗糖和葡萄糖对栝楼发根的影响,发现蔗糖更有利于栝楼发根的生长。 培养发根的目的是利用发根生产次生代谢产物,因此必须掌握不同类型发
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