【摘 要】
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研究目的:观察平足蛋白-C型凝集素样受体-2轴在脑缺血再灌注后的变化情况,观察平足蛋白(podoplanin,PDPN)封阻抗体对缺血再灌注神经功能的保护作用,探讨平足蛋白-C型凝集素样
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研究目的:观察平足蛋白-C型凝集素样受体-2轴在脑缺血再灌注后的变化情况,观察平足蛋白(podoplanin,PDPN)封阻抗体对缺血再灌注神经功能的保护作用,探讨平足蛋白-C型凝集素样受体-2轴参与脑缺血再灌注损伤的主要作用机制。材料和方法:我们引入小鼠大脑中动脉阻塞模型,利用蛋白印迹测定小鼠脑缺血再灌注后相关蛋白变化;采用免疫荧光染色检测平足蛋白-C型凝集素样受体-2轴的细胞定位;利用TTC染色检测小鼠脑缺血体积变化;应用多种行为学检测方法如圆筒实验、足错误实验、拉力实验评估平足蛋白封阻性抗体(克隆号8.1.1)干预后神经功能损伤和恢复情况;利用酶联免疫吸附实验检测多种炎性因子表达水平变化。研究结果:脑缺血再灌注损伤部位C型凝集素样受体-2(C-type lectin-like receptor 2,CLEC-2,CLEC-1b)和平足蛋白表达均明显增加,表达量于24 h达到高峰,后逐渐下降;二者以平足蛋白-C型凝集素样受体-2轴形式共同分布在大脑皮层的神经元和小胶质细胞中,参与脑缺血再灌注损伤;侧脑室注射平足蛋白封阻抗体可抑制脑卒中后C型凝集素样受体-2的上调,该抗体对平足蛋白-C型凝集素样受体-2轴有抑制作用。在脑卒中损伤急性期,利用平足蛋白封阻抗体抑制平足蛋白-C型凝集素样受体-2轴可减小脑梗死体积、减轻缺血再灌注急性期神经功能损伤,对脑卒中损伤急性期有保护作用;在康复过程中,抗体处理组小鼠前肢使用不对称情况减轻、左右踩空次数差值减小、拉力逐渐增强,说明小鼠前肢感觉功能、运动协调能力和肌肉力量逐渐改善,平足蛋白封阻抗体促进小鼠康复期神经功能恢复;平足蛋白封阻抗体可选择性降低小鼠脑损伤区域炎性因子,如白介素-18(interleukin-18,IL-18)和IL-1β表达水平,而对IL-6和IL-10无明显影响。研究结论:平足蛋白-C型凝集素样受体-2轴通过神经元和小胶质细胞参与小鼠脑缺血再灌注损伤;平足蛋白封阻抗体对脑卒中损伤有神经保护作用;平足蛋白-C型凝集素样受体-2轴通过调控炎症反应参与小鼠脑缺血再灌注损伤,这为临床治疗提供了新的靶向位点。
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