目的电刺激Sprague-Dawley大鼠杏仁核，建立慢性电点燃模型，通过药物微注射技术，将TrkB抑制剂k252a微量注射入癫痫大鼠海马内，检测活性骨架调节蛋白（Arc）在杏仁核慢性电点燃癫痫大鼠海马组织中的表达，探讨BDNF-TrkB信号传导通路与杏仁核电刺激点燃大鼠Arc表达及癫痫发生的关系。方法1.大鼠杏仁核慢性电点燃癫痫模型的建立及药物注射：健康雄性SD大鼠186只，随机将大鼠分为空白组、假手术组、实验组（单纯点燃组、k252a注射组、DMSO对照组），（1）空白组大鼠（36只）不做任何处理，不植入电极及套管。（2）电极及套管植入：参考Paxinos&Watson图谱（电极：左侧杏仁核：前囟后2.8mm，左侧旁开4.9mm，硬膜下8.6mm；套管：左侧海马：前囟后5.6mm，左侧旁开4.5mm，硬膜下5mm），SR-5R型立体定向仪辅助下，植入电极及套管，恢复7天后进行后续实验。假手术组大鼠（36只）只植入电极及套管，不行电刺激点燃。（3）刺激强度从40uA开始，每次增加10uA，刺激间期≧90s，直到EEG记录到≧3s的后发放电，为该大鼠的后放阈。点燃：每天按后放阈1.5倍强度刺激2次，直至连续5天引出V级发作视为点燃成功。癫痫发作强度按Racine分级评分。（4）药物注射：将k252a溶于DMSO（二甲基亚砜），制成每1ul溶液含10pmolk252a的溶液备用[1]。K252a组在点燃成功后开始给药，即自第6天开始，每天刺激前10分钟用5ul的微量注射器将k252a注入海马内，每次注射1ul，注射时间不少于1min。第10天刺激后根据时间点要求断头取脑。DMSO对照组只注入DMSO，条件与k252a组相同，单纯点燃组只进行连续5天的后续刺激。2.活性调节细胞骨架蛋白在电刺激大鼠杏仁核癫痫模型中的表达：根据实验要求在1h、3h、6h三个时间点亚组（n=6）检测Arc mRNA的表达，在3h、6h、12h三个时间点亚组（n=6）检测Arc蛋白的表达。各组大鼠按时间点乙醚麻醉，90只大鼠断头取脑，迅速剥离左侧海马组织，转移到1.5mlEP管，-80℃保存。90只大鼠用PBS及多聚甲醛经左心室灌注固定后取脑，4%多聚甲醛后固定，蔗糖脱水，液氮中OCT包埋后保存于-80℃冰箱中。标本应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、原位杂交和免疫组化等技术方法研究杏仁核电点燃致癫大鼠海马Arc mRNA及蛋白的表达。结果1.电刺激大鼠左侧杏仁核成功建立慢性电点燃癫痫模型：模型制作点燃成功率为93.6%，正常大鼠脑电频率较低，通常在10Hz之内，频率低、能量也低，大鼠Ⅴ级发作时的脑电频率增高到30Hz，并且能量也大大增强。检测大鼠脑电波并记录各组大鼠脑电图，k252a注射组大鼠V级发作持续时间（33.00±1.41s），显著低于单纯点燃组（60.50±2.07s）、DMSO对照组（60.00±1.79s）大鼠V级发作持续时间（P<0.01)。2.分子生物学检测显示：单纯点燃组、DMSO对照组3h Arc阳性细胞百分率增加，6h达高峰，12h回到基线水平。K252a注射组3h、6h Arc阳性细胞百分率显著低与单纯点燃组、DMSO对照组3h、6hArc阳性细胞百分率（P<0.01），3h、6h、12hArc阳性细胞百分率表达差异无统计学意义（F=1.000，P>0.05）。12h时各组Arc阳性细胞百分率表达差异相比无统计学意义（F=0.684，P>0.05）。空白组、假手术组表达差异无统计学意义（P>0.05)。RT-PCR、原位杂交结果显示：单纯点燃组、DMSO对照组Arc mRNA表达量在1h、3h明显增加，6h回到基线水平，k252a注射组1h、3h Arc mRNA表达量显著低于单纯点燃组、DMSO对照组1h、3h Arc mRNA表达量（P<0.01）。k252a注射组1h、3h、6hArc mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。6h各组Arc mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。空白组、假手术组表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论k252a能够抑制BDNF-TrkB信号传导通路对Arc表达的诱导作用从而使癫痫发作的持续时间缩短。