目的:初步评价大蒜素对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化的防治效果,为大蒜素治疗肝纤维化提供药理学依据,具体内容如下:1.大蒜素对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化的预防作用;2.大蒜素对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化的治疗作用;3.大蒜素对细胞外基质主要成分的影响;4.大蒜素对炎症细胞因子及肝脏免疫功能的调节作用。方法:采用猪血清腹腔注射法建立大鼠肝纤维化模型,实验时间共12周。将50只SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、小剂量预防组、中剂量预防组、中剂量治疗组。除正常对照组,余组采用猪血清腹腔注射法建立肝纤维化模型,5ml/只,每周2次,共12周。小、中剂量预防组于实验开始,分别予以大蒜素11、22 mg/(kg·d)灌胃,共12周。中剂量治疗组于实验第9周起予以大蒜素22 mg/(kg·d)灌胃,共4周。实验结束,将大鼠麻醉后心脏采血制备血清,留取肝脏组织样本。检测以下内容:(1)采用HE染色及天狼星红染色进行肝脏病理组织学观察;(2)肝功能:采用全自动生化仪检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TB)、间接胆红素(IB)、直接胆红素(DB);(3)血清中细胞外基质主要成分:采用ELISA法检测血清中Ⅰ型胶原(CⅠ)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢP)、Ⅳ型胶原(CⅣ);(4)肝组织中细胞外基质主要成分的表达:采用免疫蛋白印记法(Western blot)法检测肝组织中Ⅰ型胶原蛋白、Ⅳ型胶原蛋白的表达水平;(5)a-平滑肌肌动蛋白(α-SMA):采用ELISA法检测血清中α-SMA;(6)炎症因子:采用ELISA法检测血清中生长转化因子-β1(TGF-β1)、白介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α);结果:(1)肝脏病理组织学观察:肝脏病理组织学检查结果显示大蒜素预防及治疗组肝细胞变性和纤维化程度明显减轻,肝组织结构比较完好。与模型组比较,大蒜素小剂量预防组、大蒜素中剂量预防组、大蒜素中剂量治疗组纤维增生程度较轻。(2)肝功能水平变化:各组大鼠血清ALT、AST、TP、ALB、TB、DB、IB水平均位于正常范围,各组大鼠肝功能指标比较后未见明显差异,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)血清中细胞外基质的主要成分变化:与模型组比较,小剂量预防组、中剂量预防组、中剂量治疗组CⅠ、PⅢNP水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,中剂量预防组、中剂量治疗组C IV水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。(4)肝组织中细胞外基质主要成分的变化:与模型组比较,小剂量预防组、中剂量预防组、中剂量治疗组CⅠ蛋白、C IV蛋白表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)α-SMA水平变化:与模型组比较,中剂量预防组、中剂量治疗组α-SMA水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。(6)血清中炎症因子水平变化:与模型组比较,小剂量预防组、中剂量预防组IL-6、TNF-α水平明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,小剂量预防组、中剂量预防组、中剂量治疗组TGF-β1水平较明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,小剂量预防组、中剂量预防组、中剂量治疗组IFN-γ明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,小剂量预防组、中剂量预防组、中剂量治疗组IL-10水平无明显改善,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.大蒜素具有预防和治疗大鼠免疫性肝纤维化的作用,且预防效果优于治疗效果。2.大蒜素对肝细胞具有保护作用,且对肝功能无损害。3.大蒜素能够抑制HSC的活化并降低ECM的表达。4.大蒜素能够调控炎症细胞因子网络,维持Th1/Th2亚群细胞因子的平衡。