【摘 要】
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目的:本实验通过对脐血和外周血CD3AK细胞在体外扩增及杀伤活件方面的特点的对比实验,来探讨脐血CD3AK细胞对不同肿瘤细胞有无杀伤活性差异及其免疫表型变化有无时间依赖性。
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目的:本实验通过对脐血和外周血CD3AK细胞在体外扩增及杀伤活件方面的特点的对比实验,来探讨脐血CD3AK细胞对不同肿瘤细胞有无杀伤活性差异及其免疫表型变化有无时间依赖性。为脐血CD3AK细胞应用于肿瘤生物治疗提供理论依据。 材料与方法:脐血来自正常分娩的健康胎儿脐带,共10例;外周血取自健康成年人,共10例。①用淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞(cord blood mononuclear cells,CMNC)和外周血的单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PMNC)UCBMNC,PBMNC),用相同浓度的Ik-2(200U/ml)和不同浓度梯度的CD3McAb作为诱导因子,培养CD3AK细胞。观察在不同浓度、不同培养时间条件下脐血CD3AK细胞的扩增倍数;并选择适宜的诱导因子浓度,进一步比较种来源的CD3AK细胞在相同诱导因子条件下,不同培养时间的CD3AK细胞的扩增倍数。②相同培养时间的西种CD3AK细胞与人红白血病细胞(K562)共育,用MTT法,测其在不同效靶比下的杀伤率,并选择适宜的效靶比;以两种来源的CD3AK细胞作为效应细胞,用适宜效靶比,测其不同时间对K562细胞的杀伤活性。选择CD3AK细胞杀伤活性的最佳培养时间,以两种CD3AK细胞作为效应细胞,测其在相同条件下,对人红白血病细胞(K562)和人宫颈癌细胞(Hela)的杀伤活性。③用APAAP法测定脐血和外周血CD3AK细胞0、10天时的免疫表型变化。④统计学分析:组间比较采用t检验,α=0.05为显著性水准,计量资料以X±S表示,采用SSPS软件11.5版进行处理。⑤普通光学显微镜和倒置显微镜下观察CD3AK细胞的形态学变化特点,并且在瑞氏染色条件下,观察CD3AK细胞与肿瘤细胞相互作用的形态学特点。 结果:
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