论文部分内容阅读
第一部分:131I-Herceptin对乳腺癌细胞株的放射免疫治疗目的（:1）获得高标记率和纯度的131I-Herceptin（。2）了解131I-Hercep tin对高表达Her-2基因的乳腺癌细胞株的生物学作用。方法:（1）用Iodogen法将131I标记到Herceptin,Sephadex G50柱纯化,纸层析法质量检测。（2）MTT比色法检测131I-Herceptin对表达不同水平Her-2的三株乳腺癌细胞株SK-BR-3、MDA-MB-231、MCF-7的抑制作用;（3）流式细胞计数仪测量各干预组和对照组DNA倍体和凋亡率。结果:（1）Herceptin的131I标记率83.38%,放化纯94.53%（2）MTT法检测结果显示:131I-Herceptin对SK-BR-3细胞的抑制作用明显强于对MDA-MB-231﹑MCF-7细胞的抑制作用（P<0.05）,并且明显强于131I组﹑Herceptin组以及131I+Herceptin组（P<0.05）。（3）流式细胞分析表明:131I-Herceptin组的凋亡率（37.71%）要明显高于131I+Herceptin组（14.61%）（P<0.05）,Herceptin组（3.37%）和131I组（0.93%）（P<0.01）,并且各干预组都出现细胞周期的阻滞,131I-Herceptin最明显（73.19%）。结论:（1）Iodogen法131I标记Herceptin简单易行,标记效果可靠,标记率高（83.38%）,对抗体的免疫活性影响小。（2）人乳腺癌细胞株SK-BR-3高表达Her-2基因（99.30%）（3）131I-Herceptin对人乳腺癌细胞SK-BR-3组有明显的抑制和杀伤作用。第二部分:131I-Herceptin在乳腺癌动物模型中的显像研究目的:（1）建立Her-2高表达的乳腺癌动物模型。（2）对所建动物模型进行SPECT肿瘤原位显像。（3）了解小鼠体内131I-Herceptin的生物分布并计算肿瘤与非肿瘤组织的放射性比值（T/NT）和每克组织的放射性计数占注射剂量放射性计数的百分比。方法:（1）以对数生长期的SK-BR-3细胞皮下接种BALB/c-neu裸鼠建立动物模型。（2）于注射131I-Herceptin后的2﹑4﹑8﹑12﹑24、48﹑96小时对荷溜小鼠模型进行SPECT连续显像。（3）测量小鼠注射后的4﹑12﹑24﹑48小时每克各组织每分钟的放射性计数（cpm/g）,并计算T/NT以及%ID/g。结果:（1）SK-BR-3细胞皮下接种BALB/c-neu裸鼠后成榴率96%。（2）实验组在注射131I-Herceptin 2小时后就可见肿瘤部位的显像,在24小时达到最清晰图像,与周围组织对比最明显,在96小时依然可看到肿瘤部位较清晰的图像;而注射131I-mIgG的对照组,在开始4个小时可隐约看到肿瘤轮廓,随着时间推后,显像渐不清晰,96小时几乎看不到肿瘤轮廓。（3）实验组,T/NT值除了在肾脏未达到1外,在其余脏器均大于1,并且绝大多数大于3,在24小时肿瘤/肌肉的比值可达到14.87,在96小时仍然可见较大的T/NT值;在对照组,除了在骨骼和肌肉T/NT值大于1外,在其余各脏器均未达到1,并且T/NT值未见大于2的。在实验组,24小时肿瘤部位每克组织放射性计数占注射剂量放射性计数的14.85%（14.8%ID/g）,而对照组为2.05%ID/g（P<0.05）。结论:（1）以SK-BR-3细胞皮下接种裸鼠成瘤率高（96%）。（2）用131I-Herceptin对荷SK-BR-3移植裸鼠模型显像能够得到清晰的图像。（3）体内分布实验表明,131I-Herceptin注射后能得到理想的T/NT值,在24小时达到最大。