土家族常见三种景天科药用植物对抗酒精性肝病的作用探究

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在我国,少数民族群众立足于当地自然资源,发展了各具风格的民族医药文化。在湖北省恩施、宜昌土家族地区,三种景天科植物佛甲草(Sedum lineare Thunb)、垂盆草(Sedum sarmentosum Bunge)、凹叶景天(Sedum emarginatum Migo)被用于治疗肝病。土家族群众好饮烈酒,烈酒伤肝,然而,这三种植物对于酒精性肝病是否有效尚不明确。目的:探究土家族常用三种景天科药用植物佛甲草、垂盆草、凹叶景天对抗小鼠酒精性肝病的效果,初步筛选其活性成分。方法:1.佛甲草对小鼠急性酒精性脂肪肝的影响研究雌性昆明小鼠每隔12 h灌胃给予5 g/kg体重的酒精,一共灌胃三次,建立急性酒精性脂肪肝模型,同时将新鲜植物茎叶捣碎灌胃进行治疗。最后一次灌胃4 h后,处死小鼠,其血清用于肝功能检测,分析血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)的变化情况。一部分肝组织用于油红O染色,以此观察其中脂滴蓄积情况;另一部分肝组织加裂解液匀浆后,用于检测甘油三酯含量。2.垂盆草对急性酒精性脂肪肝的治疗作用及其活性部位/成分的筛选采用与佛甲草相同的方法检验垂盆草对急性酒精性脂肪肝的效果,被证实有效后,将干的垂盆草全草粉末用不同极性溶剂:石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水依次加热回流提取,将提取液加热浓缩得到浸膏。利用前述动物模型检测、筛选垂盆草各部位浸膏以及已知护肝成分垂盆草苷的抗酒精性脂肪肝效果。3.凹叶景天对早期酒精性肝炎的治疗作用及其活性部位筛选采用与佛甲草相同的方法检验凹叶景天对急性酒精性脂肪肝的效果,被证实有效后,将干的凹叶景天全草粉末用不同极性溶剂:石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水依次加热回流提取,将提取液加热浓缩得到浸膏。发现其水提物多糖含量较高,我们用多糖替代水提物进行考察。考虑到多糖一般具有良好的免疫调节作用,我们在小鼠急性早期酒精性肝炎模型上检测凹叶景天各部位的治疗效果。小鼠每隔12 h灌胃5 g/kg酒精,一共灌胃9次,第3次和第7次的时候腹腔注射脂多糖LPS,酒精灌胃同时给予小鼠凹叶景天各部位浸膏和多糖,最后一次灌胃4h后处死小鼠,其血清用于生化指标肝功能检测,分析血清中肝功能指标变化情况。肝组织用于H&E染色,以此观察肝组织中脂滴分布和损伤情况。取一部分肝组织匀浆后用于检测甘油三酯含量,辅佐证明肝组织中脂质蓄积情况。取一小部分肝组织用于透射电镜观察其肝细胞内部结构形态变化。结果:1.佛甲草能减少酒精引起的肝组织中脂质蓄积,但不能降低血脂水平血清生化指标显示,与空白对照组小鼠相比,模型组小鼠血清甘油三酯含量明显升高(p<0.05),低剂量佛甲草能改善血清中甘油三酯的含量升高,而高剂量并无治疗效果。模型组小鼠肝组织匀浆中甘油三酯含量较空白组小鼠明显升高(p<0.05),经过治疗后甘油三酯有所减少。组织油红O染色结果显示,经过治疗后,肝脏组织中脂滴分布明显减少。2.垂盆草可有效抑制酒精引起的血脂水平升高和肝脏脂肪蓄积且其有效成分为大极性部位垂盆草匀浆液可有效降低酒精引起高血脂。肝组织匀浆结果显示高剂量垂盆草比低剂量更能有效降低肝组织中的甘油三酯蓄积。肝组织油红O染色进一步证实了该结果。小极性溶剂石油醚和乙酸乙酯的提取物浸膏对酒精引起的血清和肝组织中的甘油三酯升高无治疗作用,而醇提物和水提物均能有效逆转酒精引起的血清中甘油三酯升高,且水提物对肝组织中甘油三酯的蓄积有更好的抑制作用,同时肝功能指标也显示其对肝脏有一定保护作用。组织切片H&E染色也反映了其能有效对抗酒精引起的肝组织损伤和炎性灶的产生。3.凹叶景天可有效对抗酒精引起的血清甘油三酯水平升高和肝组织中脂质蓄积以及炎性灶的产生,其对抗早期酒精性肝炎的有效部位为多糖凹叶景天高剂量对于酒精引起的血脂升高有一定逆转作用,对抗组织中的脂滴蓄积作用较好,油红O染色证明了这一结果。各部位中,粗多糖对早期酒精性肝炎血清中甘油三酯水平升高无明显逆转作用,但其能明显缓解肝脏组织中炎性灶的增多。从以上实验结果来看,三种植物对抗酒精性肝病的效果并不完全相同。对于治疗酒精引起的高脂血症的效果,垂盆草优于凹叶景天,而佛甲草对血脂水平升高并无治疗效果;对于治疗酒精引起的肝组织中脂质蓄积的效果,凹叶景天优于垂盆草优于佛甲草,且垂盆草苷并不是垂盆草对抗酒精性肝病的活性成分。因而进一步对治疗效果较好的垂盆草和凹叶景天进行了成分分离,发现二者治疗效果较好的部位均为水提物,通过检测发现水提物中多糖含量较高。结论:本实验围绕景天科三种植物佛甲草、垂盆草、凹叶景天治疗酒精性肝病展开实验,佛甲草对于酒精性脂肪肝病治疗效果稍差,垂盆草和凹叶景天对降低血清和肝组织中甘油三酯水平均有较好作用,且二者各部位提取物中,水提物治疗效果最好,对酒精引起的肝损伤有较好的逆转效果,凹叶景天多糖具有抗酒精性肝炎的效果,但景天科抗酒精性脂肪肝物质基础尚不明确。本实验为进一步探究景天科植物对抗酒精性肝病物质基础和作用机制奠定了一定基础。
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