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研究目的浸润性微乳头状癌(Invasive micropapillary carcinoma,IMPC)是浸润性乳腺癌的一种特殊亚型,具有高淋巴管侵犯、高淋巴结转移、高复发和远处转移等生物学行为。miRNA是一类非编码小RNA,其异常表达与多种癌症的发生发展密切相关,本课题组前期研究发现miR-27a在IMPC中表达显著下调,生物信息学分析表明GATA3是miR-27a的潜在靶基因。本研究检测miR-27a和GATA3在IMPC和浸润性导管癌非特殊类型(Invasive ductal carcinoma not otherwise specified,IDC-NOS)中的表达差异,并分析其与患者临床病理学特征及预后的相关性,进而揭示miR-27a和GATA3在乳腺IMPC中表达的意义。研究方法1、收集天津医科大学肿瘤医院2008年1月至2009年12月手术的211例女性乳腺癌患者的临床资料,包括混合型IMPC患者102例,IDC-NOS患者109例。免疫组化检测GATA3在IMPC和IDC-NOS中的表达水平,原位杂交检测miR-27a在IMPC和IDC-NOS中的表达水平。统计分析miR-27a和GATA3与临床病理学特征和患者预后之间的相关性。2、选取26例2019年3月至2019年4月手术的IMPC和IDC-NOS新鲜组织样本。通过实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测miR-27a和GATA3在新鲜组织、原代细胞和乳腺癌细胞系中的表达水平。研究结果1、IMPC与IDC-NOS组织在临床病理学特征上存在差异,IMPC患者淋巴结转移阳性率(p<0.01)和ER阳性率(p=0.017)均显著高于IDC-NOS患者。原位杂交结果显示miR-27a在IMPC组织中低表达,且miR-27a的表达与淋巴结转移(r_s=-0.228,p=0.021)和肿瘤分期(r_s=-0.256,p=0.009)呈负相关。免疫组化结果显示GATA3在IMPC组织中高表达,且GATA3的表达与淋巴结转移(r_s=0.230,p=0.022)、ER(r_s=0.536,p<0.01)和PR(r_s=0.264,p=0.011)的表达呈正相关,与HER2(r_s=-0.251,p=0.010)的表达呈负相关。2、RT-q PCR检测13例混合型IMPC新鲜组织样本和13例IDC-NOS新鲜组织样本中的miR-27a和GATA3的表达情况。发现与IDC-NOS相比,miR-27a在IMPC新鲜组织样本中呈低表达(p<0.05),GATA3在IMPC新鲜组织样本中呈高表达(p<0.05)。3、GATA3在T47D和MCF7细胞系中呈高表达,在MDA-MB-231和SK-BR3细胞系中呈低表达,在MCF-10A细胞系中呈中等表达。T47D和MCF7细胞系可以构建稳定GATA3低表达的细胞株,MDA-MB-231和SK-BR3细胞系可以构建稳定GATA3高表达的细胞株。miR-27a在MCF-10A细胞系中呈高表达,在MDA-MB-231、MCF7和SK-BR3细胞系中呈中等表达,在T47D细胞系中呈低表达。MCF-10A细胞系可以构建稳定miR-27a低表达的细胞株,T47D细胞系可以构建稳定miR-27a高表达的细胞株。4、Kepian-Meier生存曲线分析发现GATA3高表达患者的无病生存期(Disease-free survival,DFS)和总生存期(Overall survival,OS)低于GATA3低表达患者(p=0.026,p=0.013);miR-27a高表达患者的DFS(p=0.026)和OS(p=0.008)显著高于miR-27a低表达患者。多因素Cox比例风险模型分析显示GATA3对于IMPC患者的DFS和OS没有独立预后意义,而miR-27a表达是IMPC患者DFS(HR=0.812;95%CI:0.043-0.938;p=0.033)和OS(HR=0.738;95%CI:0.560-0.929;p=0.018)的独立预后因素。研究结论与IDC-NOS相比,miR-27a在IMPC中低表达,GATA3在IMPC中高表达。miR-27a和GATA3与乳腺IMPC患者的淋巴结转移相关,miR-27a和GATA3两者表达呈负相关。GATA3对于IMPC患者的DFS和OS没有独立预后意义,miR-27a低表达的IMPC患者较高表达患者预后不良,且是IMPC患者DFS和OS的独立预后因素,miR-27a是乳腺IMPC潜在的预后标志物。