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目的探讨PI3K抑制剂YY-20394对弥漫大B细胞淋巴瘤（Diffuse large B cell lym Phoma,DLBCL）是否具有抗肿瘤效应,对于不同细胞起源的DLBCL其作用是否有差异,并进一步探讨YY-20394的作用机制,为临床YY-20394治疗DLBCL提供理论依据。方法1、采用CCK8试剂盒检测YY-20394对SUDHL-4细胞和U2932细胞增殖抑制的影响;绘制细胞生长曲线,并计算出24h药物的IC25、IC50、IC75。2、采用流式细胞术检测YY-20394对SUDHL-4细胞和U2932细胞凋亡的影响。3、采用高通量RNA测序技术（RNA-Seq）对细胞进行转录组表达定量,进行细胞基因表达差异分析,探讨YY-20394对DLBCL细胞基因表达的影响。4、对差异基因进行KEGG信号通路富集分析和GO富集分析,探究YY-20394对DLBCL细胞生物学过程的影响。5、对细胞基因表达数据进行肿瘤相关信号通路GSEA富集分析,进一步探究YY-20394对DLBCL细胞中的肿瘤相关信号通路活化水平的影响。结果1、不同浓度YY-20394（0.875,1.75,3.5,7,14μmol/L）作用于SUDHL-4细胞24h后的细胞增殖抑制率分别为（29.19±0.75）%、（42.99±2.51）%、（52.37±2.98）%、（62.56±2.51）%、（72.72±2.53）%;48h的细胞增殖抑制率分别是（42.33±3.21）%、（54.55±4.01）%、（73.71±3.86）%、（82.83±3.32）%、（90.33±1.53）%;细胞增殖抑制剂率随着药物浓度增高和作用时间延长而增加,差异有统计学意义,P＜0.05。计算出药物24h的IC25、IC50、IC75分别为（0.69±0.71）μmol/L、（3.30±0.46）μmol/L、（15.79±2.31）μmol/L。2、不同浓度YY-20394（0.875,1.75,3.5,7,14μmol/L）作用于U2932细胞,24h后的细胞增殖抑制率分别为（2.33±0.09）%、（2.95±0.15）%,（2.85±0.12）%、（2.52±0.06）%、（3.17±0.20）%;48h的细胞增殖抑制率分别为（2.56±0.21）%、（2.96±0.12）%、（2.85±0.55）%、（2.77±0.29）%、（2.93±0.34）%;细胞增殖抑制率不随着药物浓度增高和作用时间延长而增加,差异无统计学意义,P＞0.05。3、分别使用增殖抑制实验中计算得到的YY-20394在24h的IC25（0.69±0.71）μmol/L、IC50（3.30±0.46）μmol/L、IC75（15.79±2.31）μmol/L浓度作用SUDHL-4细胞24h,细胞凋亡率分别是（6.87±0.37）%、（14.95±0.25）%、（40.58±0.52）%;48h的细胞凋亡率分别是（11.38±0.19）%、（21.84±0.31）%、（47.94±0.26）%。不同浓度（0.69μmol/L、3.30μmol/L、15.79μmol/L）不同作用时间（24h、48h）的细胞凋亡率差异均有统计学意义,P＜0.05。4、不同浓度的YY-20394（0.875,1.75,3.5,7,14μmol/L）作用U2932细胞24h,细胞凋亡率分别为（4.42±0.15）%、（4.36±0.21）%、（4.31±0.22）%、（4.29±0.11）%、（4.32±0.14）%,各药物浓度组细胞凋亡率与对照组凋亡率（4.28±0.22）%无明显区别,差异无统计学意义,P＞0.05。5、YY-20394作用SUDHL-4细胞后差异表达的上调基因有259个,下调基因有341个。KEGG富集分析结果显示,YY-20394对SUDHL-4细胞的抗肿瘤作用涉及m TOR信号通路、AMPK信号通路、PI3K-AKT信号通路、Ras信号通路、NF-κB信号通路、BCR信号通路。GO分析表明PI3K抑制剂通过影响醇类物质合成、m RNA分解、细胞氨基酸代谢、细胞周期和细胞凋亡等重要细胞生物学功能发挥抗肿瘤作用。6、GESA富集分析结果显示,YY-20394导致SUDHL-4细胞的Hedgehog（Hh）信号通路、JAK-STAT信号通路、MAPK信号通路、NF-κB信号通路、Notch信号通路、PI3K-AKT信号通路、Wnt信号通路的活性下调。7、YY-20394作用U2932细胞后差异表达的上调基因有12个,下调基因有3个。KEGG富集分析未富集到具有显著水平的信号通路。GO分析表明,细胞组分定位在信号识别颗粒、内质网上;生物过程方面,主要与共翻译蛋白、以内质网为靶点的蛋白质等蛋白质的生物过程相关;在分子功能方面,主要与异源生物跨膜转运蛋白活性、钠转运体活性调节相关。8、GSEA富集分析结果显示,U2932细胞中PI3K-AKT信号通路活化水平显著低于SUDHL-4细胞。结论1.PI3K抑制剂YY-20394对GCB-DLBCL细胞SUDHL-4有增殖抑制和诱导凋亡的作用,其效应呈药物剂量和药物作用时间依赖性。2.YY-20394主要通过抑制PI3K-AKT信号通路、NF-κB信号通路、MAPK信号通路、JAK-STAT信号通路、Notch信号通路、Wnt信号通路、Hedgehog信号通路等肿瘤相关信号通路的激活水平对SUDHL-4细胞发挥抗肿瘤作用。3.YY-20394对ABC-DLBCL细胞U2932无明显的增殖抑制和诱导凋亡的作用,GSEA富集分析结果显示U2932细胞中PI3K-AKT信号通路激活水平显著低于SUDHL-4细胞。