【摘 要】
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目的:探讨沉默长链非编码RNA-HOTAIR对脑胶质瘤U251细胞恶性生物学行为的影响及其相关机制,进一步明确脑胶质瘤的发生、发展,为脑胶质瘤的治疗开辟新道路。方法:将U251人脑胶
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目的:探讨沉默长链非编码RNA-HOTAIR对脑胶质瘤U251细胞恶性生物学行为的影响及其相关机制,进一步明确脑胶质瘤的发生、发展,为脑胶质瘤的治疗开辟新道路。方法:将U251人脑胶质瘤细胞分组成空白对照组(control),阴性对照组(sh-NC)及实验组(sh-HOTAIR),培养至对数生长期,依次应用MTT法检测细胞增殖情况;利用qRT-PCR检测HOTAIR mRNA表达水平;采用磷酯酰丝氨酸联络蛋白-异硫氢酸荧光素/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况;应用Transwell体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力;利用蛋白免疫印迹法(WesternBlot)检测各组凋亡相关蛋白Bcl-2,侵袭相关蛋白MMP-2,促凋亡蛋白Bax,PI3K/Akt信号通路重要蛋白蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)的表达水平。结果:MTT结果提示,人脑胶质瘤细胞U251转染shRNA-HOTAIR增值率低于对照组(P<0.05),qRT-PCR检测细胞转染shRNA-HOTAIR后HOTAIR mRNA表达较对照组明显下调(P<0.05),流式细胞术数据显示shRNA-HOTAIR可以降低细胞凋亡率(P<0.05),WesternBlot结果提示shRNA-HOTAIR可以降低细胞P-Akt、Bcl-2、MMP-2,增加Bax的表达程度。结论:沉默LncRNA-HOTAIR可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,降低细胞侵袭,其分子机制可能与活化PI3K/AKT信号通路有关。
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