胶原蛋白-壳聚糖静电纺丝膜复合海藻酸盐防海水浸泡敷贴的研究

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:lonwang
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海上作业人员工作时容易受伤且短时间内伤口不能得到有效医治,同时由于海水具有高盐高渗等特性,伤口经海水浸泡后容易造成水肿且难以愈合。所以对于海上作业人员来说,伤口敷贴除了具有优良的止血及促愈合功能外,还应该能有效阻隔海水对伤口创面的伤害。现有医用敷贴不具有防浸泡功能,所以研制一种能够防海水浸泡的伤口敷贴显得尤为重要。PU膜的防水透湿性能够很好地满足防海水浸泡敷贴的要求。本实验以3丝、5丝、8丝三种厚度的PU膜为研究对象,分别涂以20 g、22 g、24 g的医用205压敏胶和28 g、30 g的3768医用压敏胶,如此形成3组共15种PU膜样品,通过研究其舒适性、水接触角、水蒸气透过性、持粘性、剥离强度等特性,采用新西兰大白兔浸泡模型研究其防海水浸泡性能,筛选出具有最优防海水浸泡特性的PU膜类型。结果表明,涂抹24 g 205胶的5丝PU膜水接触角大于90°,提示其表面疏水;舒适性佳,水蒸气透过性为907 g/24h·m~2,持粘性为0 mm,具有最大的剥离强度(10.09 N/25mm);防浸泡时间至少能够达到22 h;热稳定性好;综合性能优良,能够很好满足防海水浸泡敷贴的防水透湿要求。将I型胶原蛋白和壳聚糖按20:1(质量比)比例配置成混合静电纺溶液,再迅速将混合静电纺溶液高电压静电纺丝于海藻酸盐底布上,就得到了胶原蛋白-壳聚糖静电纺丝膜复合海藻酸盐敷料,其能够吸收自身质量13倍的水,孔隙率为87%,微孔结构密集,具有良好的吸湿性;pH值为6.48,满足伤口敷料的要求;水蒸气透过率为0.0149 g/h·cm~2,透气性能优良。将敷料复合PU膜制成的胶原蛋白-壳聚糖静电纺丝膜复合海藻酸盐防海水浸泡敷贴,能起到防海水浸泡,保护伤口,吸收伤口渗液,促进伤口愈合的作用。通过体外凝血实验、兔耳动脉创伤止血实验和兔背部创伤止血实验评价CCEAD的止血性能。建立大鼠背部全皮层创伤模型,分别在术后3、5、7、12 d拍照计算伤口愈合率,测定CCEAD的促愈合作用;取伤口创面皮肤组织,HE染色观察组织病理学变化;免疫组化染色观察在伤口愈合过程中CD31、FGF-2和TGF-β的表达情况。结果表明,CCEAD组的体外凝血指数BCI为36.91%±6.62%,显著小于阳性对照明胶海绵组(69.82%±1.83%)和阴性对照医用纱布组(79.93%±6.30%)(P<0.01)。兔耳动脉创伤止血实验中,CCEAD组的止血时间(107.67 s±17.62 s)短于医用纱布组(163.67 s±15.50 s)(P<0.05)。兔背部创伤止血实验中,CCEAD组Hb光度吸收值(0.120±0.052)明显低于医用纱布组(0.294±0.021)(P<0.01)。在促创伤愈合实验中,术后第7天,CCEAD组愈合率为65.70%±4.94%,高于阳性对照壳聚糖敷料组(48.78%±8.33%)(P<0.05),明显高于医用纱布组(37.76%±6.35%)(P<0.01)。HE染色显示,CCEAD在伤口愈合早期能够促进成纤维细胞生长和新生血管形成,促进肉芽组织的生成。免疫组化结果显示,CCEAD能促进CD31、FGF-2和TGF-β在伤口愈合早期的表达,有利于伤口的愈合。通过细胞毒性试验,皮肤刺激性试验和皮肤致敏性试验评价CCEAD安全性。结果表明,CCEAD浸提液处理的细胞生长良好,为0级无毒,用CellTiter-Glo细胞活力检测试剂盒测定HaCat细胞和HUVEC细胞相对活力均大于80%,用CCK-8试剂盒测定HaCat细胞和HUVEC细胞相对活力均大于90%,说明细胞活力未受到抑制,CCEAD无细胞毒性;CCEAD单次和多次皮肤给药,家兔皮肤未见明显损伤性病理学改变,说明CCEAD无明显刺激性;CCEAD低剂量组和高剂量组豚鼠皮肤均未见明显红斑和水肿,CCEAD无明显致敏作用。提示其作为伤口敷料安全可靠。本实验研制的胶原蛋白-壳聚糖静电纺丝膜复合海藻酸盐防海水浸泡敷贴可保护伤口免受海水伤害,具有止血和促愈合作用。无细胞毒性,无皮肤刺激性和致敏性,安全可靠,对海上作业人员伤口愈合具有重要意义。
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