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目的:通过观察养阴清热理气方(A)及各拆方,当归、女贞子(Y);天花粉、蚤休(Q);旋覆花、八月札(Q)对人食管癌细胞移植瘤裸鼠心、肺、肝、脾,胃的病理和PI3K、PLD蛋白表达的影响,初步探讨养阴、清热、理气法治疗食管癌引起生命脏器病理改变的机理,探讨阴虚、热毒及气郁与食管癌病变时生命脏器病变和PI3K、PLD蛋白表达的关系。
方法:采用皮下种植EC9706细胞造模的荷瘤裸鼠为实验对象,设空白组(K)、模型组(M)、养阴组(Y)、清热组(Q)、理气组(L),全方组(A养阴清热理气方)共六组。记录裸鼠饮水饮食量及体重,观察荷瘤裸鼠一般行为表现,统计肿瘤倍增时间,肿瘤倍增体积,处死裸鼠,取心、肺、肝、脾,胃制作石蜡切片,HE染色观察各生命脏器病理形态学改变,进而使用SABC免疫组化法观察受损生命脏器关键分子的表达状况。
结果:①养阴清热理气方及各拆方对裸鼠肿瘤增殖有明显抑制,全方组抑瘤率(抑瘤率=(1-给药组平均瘤重/对照组平均瘤重)×100)最好,为54.11%,余依次为养阴44.06%、清热31.98%,理气26.84%。肿瘤的倍增体积Td=log2(t1-t0)/(v1-v0)t为天数v为体积。全方效果最好数值最小,余为养阴、清热,理气。②人食管癌细胞移植瘤裸鼠重要生命脏器发生明显病理组织学改变,实验动物的心肌纤维可见细胞脂肪变性异常病理改变,肝脏少部分肝细胞有轻度变性、肝细胞索紊乱肝窦变窄;脾脏红白髓分界清楚,脾小结明显缩小及淋巴细胞明显减少而稀疏肺组织中细支气管及间质,肺泡间隔均明显的充血和炎细胞渗出等病理改变。胃黏膜上皮细胞明显萎缩,粘膜下组织、肌层、和浆膜层均未见异常病理改变。③养阴清热理气方及各拆方对裸鼠生命脏器损伤有不同影响,各组间有显著差异,全方效果最好。④免疫组化法.在各生命脏器内可检测到PI3K、PLD蛋白分子表达,胃组织中PI3K在模型组总表达降低用药组均有不同程度增强,以全方组最高。在心肺脾组织中PLD表达,心肺均为模型增强,用药组降低:脾中模型组降低,用药组增强。
结论:①养阴清热理气方及各拆方均能明显改善人食管癌细胞移植瘤裸鼠饮水饮食量,体重等一般情况。能明显抑制移植瘤增生,以全方效果最好,三方联用具有协同作用。②人食管癌细胞移植瘤裸鼠生命重要脏器发生明显病理组织学改变。③养阴清热理气方及各拆方均明显改善人食管癌细胞移植瘤裸鼠生命重要脏器病理组织学改变。④人食管癌细胞移植瘤裸鼠重要生命脏器病理损伤的改变与PI3K、PLD蛋白表达相关。⑤在食管癌病变中,阴虚,热毒,气郁症候病机的发生与肿瘤引起的生命脏器病理损伤相关,与生命脏器PI3K、PLD表达有密切关联。⑥清热养阴理气方是治疗食管癌引起的生命脏器受损的有效治疗方剂。