【摘 要】
：
背景:弓形虫作为一种机会性致病性原虫,在免疫系统正常的人群中,弓形虫一般为隐性感染。而在长期免疫力低下、免疫抑制或者免疫缺陷的人群中,会引发严重的弓形虫病。比如弓形虫脑炎,弓形虫眼病等。而其中弓形虫眼病发病的分子机制目前仍不清楚。弓形虫棒状体蛋白ROP18（TgROP18）是弓形虫重要的毒力蛋白,是一种丝/苏氨酸激酶,据文献报道,TgROP18蛋白可以通过磷酸化宿主细胞的关键蛋白,调节宿主免疫,细
【基金项目】
：
国家自然科学基金面上项目（No.81572012,81772217,201828006,81971954）； 广东省自然科学基金重点与面上项目（2016A030311025,2017A030313694）； 广东省科技计划项目（2018A050506038）； 广州市科学研究计划重点项目（2019
论文部分内容阅读
背景:弓形虫作为一种机会性致病性原虫,在免疫系统正常的人群中,弓形虫一般为隐性感染。而在长期免疫力低下、免疫抑制或者免疫缺陷的人群中,会引发严重的弓形虫病。比如弓形虫脑炎,弓形虫眼病等。而其中弓形虫眼病发病的分子机制目前仍不清楚。弓形虫棒状体蛋白ROP18（TgROP18）是弓形虫重要的毒力蛋白,是一种丝/苏氨酸激酶,据文献报道,TgROP18蛋白可以通过磷酸化宿主细胞的关键蛋白,调节宿主免疫,细胞周期、凋亡等相关信号通路,进而促进弓形虫入侵宿主细胞和在宿主细胞内的存活。我们前期利用双分子荧光互补技术（BiFC）筛选与ROP18互作的宿主蛋白实验中,我们筛选到与TgOP1811蛋白互作的宿主人视网膜特异性蛋白CLUL1。本研究通过验证TgROP1811蛋白与CLUL1的互作以及两者的互作特点,研究CLUL1在神经胶质瘤细胞中的功能,以探究CLUL1蛋白在弓形虫眼病中是否可能是发病的一个潜在靶点。方法:构建质粒,体外过表达CLUL1蛋白和TgROP18以及TgROP18突变体蛋白,用FRET和CO-IP方法验证两者之间的相互作用以及互作结构域,应用CRIPR-Cas9的方法构建TgROP18蛋白C端融合表达标签蛋白的ME49虫株,以检测弓形虫内源性ROP18蛋白与CLUL1蛋白相互作用,应用Western Blot检测CLUL1的磷酸化水平、泛素化水平。RNAi敲低CLUL1蛋白,用流式细胞术检测CLUL1在神经细胞中的功能。结果:TgROP18蛋白与CLUL1蛋白存在相互作用,ROP18激酶区是两者之间的互作结构域。ROP18可以促进CLUL1磷酸化,并促进CLUL1泛素化经蛋白酶体途径降解,而且该过程依赖于ROP18蛋白与E3连接酶的结合。通过RNAi敲低细胞内CLUL1后,神经细胞的凋亡率显著上升,CLUL1蛋白发挥抑制凋亡的作用。结论:弓形虫在入侵视网膜神经细胞时,分泌ROP18蛋白,ROP18蛋白发挥其激酶活性,使CLUL1蛋白磷酸化,而磷酸化的CLUL1蛋白被泛素标记,使CLUL1蛋白经泛素-蛋白酶体途径降解,进而抑制CLUL1蛋白抗凋亡相关通路的功能,促进细胞的凋亡,从而可能参与弓形虫眼病的发生。
其他文献
随着互联网行业的发展,越来越多的软件被应用到人们的生活和工业的生产中,良好的软件质量不仅可以提高工作效率,而且还可以减少大量的手工成本。软件缺陷定位作为保证软件质量中的一环被广泛研究,它旨在帮助测试人员快速找到软件的缺陷位置并修复,提高软件的可靠性和稳定性并降低人力资源成本。近年来,国内外研究人员提出了很多关于软件缺陷定位的方法,但仍然存在一些问题有待解决,例如如何在不降低定位精度的前提下减少定位
主题语境是《普通高中英语课程标准(2017年版2020年修订》所提出的课程内容六要素中的第一个要素,主题为语言学习者提供了语境,是意义建构的基础,为学生表达思想提供框架。主题意义的探究是学生学习的重要内容,也是学生书面表达的重要前提,为他们在写作中清楚阐述观点和表达情感奠定坚实基础。书面表达不仅要求学生有语言知识的积累,而且要求他们具有较强的综合语言运用能力。纵观现在英语写作教学现状,有些教师在布
歧义是语言中的固有现象,英语学习者在学习过程中经常不可避免的接触到语法、词汇、句法等各种语言层面的歧义现象。歧义容忍度指学习者在习得语言过程中面临歧义现象时,所产生的一种容忍的心理接受程度。高中英语阅读中普遍存在歧义现象。然而,由于高中英语教学对英语歧义容忍度认知问题重视不够,加之在英语教学中,对阅读策略的训练也有所忽视,导致高中学生英语阅读能力普遍低下。因此,如何有效提高英语阅读能力成为高中英语
卧式斜板重力除油器常受到布水构件设计、分离区斜板结构、进水含油量等影响，导致实际除油率常低于设计值。为了明确提升除油器油水分离性能的影响因素，建立了卧式斜板重力除油器CFD（计算流体力学）模型，模拟分析了除油器内部结构、进水水质和工艺运行参数对除油器油水分离性能的影响。结果表明：在除油器内部添加了上孔箱和布液板构件后，除油器内流场分布更加稳定，有效提高了除油率，添加斜板构件也可显著提高设备的除油率
《普通高中思想政治课程标准（2017年版2020年修订）》明确提出思想政治学科核心素养,即政治认同、科学精神、法治意识和公共参与。政治认同是四大核心素养的灵魂和方向。《中国特色社会主义》是高中思想政治必修课程的第一个模块,对培育政治认同起引领作用。在《中国特色社会主义》教学中培育政治认同,是落实学科核心素养的现实要求,也是提升高中学生政治素养的内在需要。结合问卷调查和教师访谈,对《中国特色社会主义
习近平法治思想的提出为我国新时代法治事业的发展指明了方向,而法治事业的持续推进则需要国民法治素养的不断提高作为支撑。在此背景下,开展法治教育特别是针对青少年的法治教育意义重大。初中《道德与法治》课作为面向青少年开展法治教育的专门课程,其在实施过程中却存在着法治知识难教,学生学习法治知识兴趣低下等情况,直接制约着初中《道德与法治》课法治教育效果。开发运用法治教学资源是破解初中《道德与法治》课法治教育
项目来源1.广东省禽类市场环境禽流感病毒污染监测项目2.禽类饲养和贸易链中禽流感病毒污染关键点和传播研究项目。研究目的1.了解2016年9月-2018年8月间广东省活禽市场中不同亚型禽流感病毒的污染和分布情况。2.阐明广东省活禽市场禽流感病毒的主要来源,本文主要探究H3N2亚型禽流感病毒基因重配情况。3.监测禽流感病毒的变异情况,本文主要研究H5N6亚型禽流感病毒血凝素基因变异情况。研究方法1.病
研究背景及目的基孔肯雅热是基孔肯雅病毒感染所致,由白纹伊蚊和埃及伊蚊传播的一种虫媒传染病。我国早在1987年就报道了首例基孔肯雅热。迄今为止,世界上约有39%的人口居住在有基孔肯雅病毒流行的国家和地区,面临着被感染的风险。随着生态环境和气候条件的改变,全球气候变暖的趋势更加明显,埃及伊蚊和白蚊伊蚊活动范围逐渐扩大,国际经贸和文化的来往愈发频繁,基孔肯雅病毒在全球范围内的扩散速度越来越快,极有可能对
新时代新课程改革的目的是为了更好的全面推进素质教育,从而提高学生的自主学习和合作探究的能力。教学思想的变更,教学内容的改革,教学方法的创新都对任课教师的教学能力和教学方法提出了更高的要求。为了贯彻新课程改革的精神,推广新的教学模式,高中思政课不仅仅要求教学成绩的提高,更要求教师在教学中与学生共同成长。作为教师要更加关注学生主体性的体现,要在教学过程中做好课堂主导者的身份,引导学生发现问题、分析问题
唐人豪侠小说中出现了数量众多的女侠形象,且该类形象具有丰富的审美文化内涵与独特的艺术审美价值。目前学界主要从女侠的创作背景、类型分析、文化内涵、后世影响等方面进行研究,很少从审美文化层面分析其思想精神内涵。本文从审美文化角度入手,立足于唐代侠义文学创作传统,运用文本解读、美学研究等方法,从女侠形象的渊源及其分类,审美文化表现、美学价值及后世影响三个方面展开,探讨唐人豪侠小说女侠形象的审美文化内涵。