树突状细胞(Dendritic Cell, DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine Induced Killer cell, CIK)在肿瘤的细胞免疫治疗中扮演了关键角色。DC作为人体最强的抗原递呈细胞(Antigen-Presenting Cell, APC),以主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex, MHC)分子限制性的方式识别肿瘤抗原,激活淋巴细胞以杀伤肿瘤；CIK以MHC非限制性的方式直接杀伤肿瘤细胞。两种细胞在人体外周血中十分稀少。利用其前体细胞在体外培养,诱导分化或扩增出足够数量且质量合格的细胞,回输肿瘤患者,是安全、有效地进行细胞免疫治疗肿瘤的前提。目的：第一部分：为确保免疫细胞(DC和CIK)体外采集、分离、培养、冻存等操作规范化和标准化,得到符合临床应用级别的细胞,确保细胞免疫治疗疾病以安全、有效的方式进行,本室遵循国内外相关法规,以及欧盟和中国良好生产规范(Good Manufacturing Practice, GMP)的要求,以期建立DC和CIK体外操作的一系列标准操作规程(Standard Operating Procedure, SOP),并初步制定DC和CIK质量标准。第二部分：分别对1例早期乳腺癌、1例晚期卵巢癌和5例健康成年人的免疫细胞,在培养前、后的细胞数量、细胞表型和功能进行比较,初步探讨不同个体间(健康人或肿瘤患者)的免疫细胞表型和功能的差异,为个体化的细胞免疫治疗肿瘤提供初步的实验依据。方法：以《人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则》、《白体免疫细胞治疗技术管理规范》、《中国药典》、欧盟GMP、《中国GMP实施指南》等为指导,针对前体细胞-外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC)的采集、分离、冻存,DC. CIK培养和扩增、表型鉴定和功能检测等过程,制定SOP；遵循已制定的SOP,对DC和CIK体外培养和检测等过程进行质量控制；对1例早期乳腺癌、1例晚期卵巢癌和5例健康人分离得到PBMC.培养扩增得到的DC和CIK进行免疫相关参数的比较。结果：1、通过本研究,已初步建立一系列DC、CIK体外操作相关的SOP；遵循这些SOP,对免疫细胞体外操作过程进行了质量控制,并初步获得了DC和CIK细胞质量标准。2、我们发现在自体血浆培养条件下与在胎牛血清和人AB血清条件下培养得到的DC表型和功能相比,并无显著性差别。3、呈粘附生长状态的DC与传统的非粘附生长的DC相比,其表型和功能也无显著差别,是质量合格的DC,在收获DC时无需丢弃。4、免疫细胞个体化差异的初步研究表明：在不同个体间,免疫细胞在培养前后,其细胞数量、表型和功能等方面都存在差异,为个体化的细胞免疫治疗提供了初步的实验依据。结论：在GMP条件下建立DC和CIK体外培养一系列SOP和质量标准,符合国家法规的要求,为DC、CIK将来临床应用提供了安全保证。免疫细胞个体化差异初步的研究结果提示我们：进行个体化细胞免疫治疗肿瘤的可能性。