研究背景及目的： 众所周知，卒中是一类严重影响人类健康的常见病、多发病，是三大致死病因之一，同时也是最重要的致残性疾病，而且大约40％的患者会复发或再发。高血压是脑卒中最重要的独立危险因素，所致的各级脑动脉结构损害是脑卒中发生的病理基础，减轻脑血管结构损害可有效预防脑卒中。 高血压基本的血流动力学异常，是由于小血管壁结构的改变所致的血管内径减小，而引起的外周阻力持续增加，称为血管重塑。高血压所致的脑血管结构改变主要包括管腔狭窄、壁腔比改变和微小动脉立体构筑稀疏，随之产生血管功能异常。血管重塑既是高血压的重要病理变化，又是高血压维持和恶化的结构基础。血管重塑与内皮细胞功能障碍，血管平滑肌细胞(VSMC)增生、肥大、重排、细胞表型的转化和细胞外基质增加有关。 微循环是直接为神经元提供营养代谢物质的部位，同时也起着治疗时将药物带至受损部位的作用。当上游较大脑血管受损时，微循环也会继发性地发生结构和功能的改变，这在脑损伤机制中起重要作用，因此，及时改善高血压时的微循环损害，在卒中的防治中起着关键性的作用。 以往研究绝大部分是以自发性高血压大鼠 (spontaneously hypertensive ratsSHR)为模型进行的，该模型在很多程度上受遗传因素的影响，其血管结构改变不是单纯由高血压引起。而易卒中型肾血管性高血压大鼠(Stroke-pronerenovascular hypertensive rats RHRSP) 无遗传局限性，其血管损害纯粹由高血压因素引起，在研究高血压性血管损害方面有其优越性。 已有临床试验发现，ACEI、AT-1受体拮抗剂、长效的钙通道拮抗剂治疗一年，能校正高血压患者的小动脉结构和内皮功能障碍。然而，β-肾上腺受体拮抗剂无此作用。虽然控制血压是阻止血管重塑的一个因素，但是有研究显示血管结构不仅仅受血压影响，而且血管重塑存在不依赖于血压增高的新机制。中药提取物作为药物是中药现代化目标之一，已有研究显示：麝香酮可明显改善血管内皮舒张功能异常，该药成本低、毒副反应少，同时可扩张血管、增加心肌血流量。芦荟大黄素是从芦荟中提取的活性成分葸醌类衍生物之一，具有多种药理作用，以往的研究发现，它是一种强平滑肌细胞增殖抑制剂，这种药理作用在体内可能有利于减轻平滑肌细胞的增殖，而平滑肌细胞增殖是高血压阻力血管重塑的关键因素。 本实验研究血管结构变化与血压水平的关系，系统地观察RHRSP在高血压形成的不同时期血压的变化，及术后12周，血浆ET、大脑中动脉α-SM-actin分布及脑微循环的变化。观察麝香酮、芦荟大黄素治疗对血压、血浆ET及脑血管重塑的影响，为中药提取物防治高血压、脑卒中提供客观的实验依据。 方法： 1．实验动物模型制备及血压测量选用鼠龄60～90天、体重80～100g的雄性SD大鼠85只，随机将其中70只用双肾双夹法复制成RHRSP模型。另外15只除不上银夹外，其余处理同手术组，作为假手术组。术前3天经尾动脉测量清醒状态下收缩压作为基础血压，术后每2周测血压1次。 2．实验动物分组及给药： 将造模成功(肾动脉术后8周血压≥20.0KP，且血压稳定增高者)的48只大鼠随机分成四组：麝香酮组(100mg/kg·d)、芦荟大黄素高剂量治疗组(0.5mg/kg.d)、芦荟大黄素低剂量治疗组(0.25mg/kg·d)和高血压组，每组12只。另外12只作为假手术组。麝香酮、芦荟大黄素治疗组于术后第9周开始给药，同时假手术组和高血压组大鼠以1ml/100g生理盐水灌胃，1次/d，连续4周。 3．内皮素(ET)标本采集及病理观察术后12周末的各组大鼠，抽取静脉血分离血浆，测内皮素(ET)水平。并灌注固定后，取右侧大脑中动脉中段(3mm)，作病理观察：(1)常规制备石蜡切片，HE染色，光镜观察；(2)以α-SM-actin作为血管平滑肌的标志来观察MCA的血管重塑：图像分析染色阳性的MCA中膜外缘所围面积和直径，管腔面积和内径，中膜VSMC阳性染色面积。另透射电镜观察项叶皮质微循环结构的变化。 4．统计学分析统计术前及术后第2、4、6、8、10及12周血压；术后12周血浆中ET的水平；大脑中动脉的管径、中膜平滑肌面积、壁腔比。全部数据用SPSS for windows11.0 统计软件分析。血压资料作Bartlett球形检验和重复测量数据的多元方差分析，余数据作组内和组间方差分析和 LSD-t 检验，观察其统计学意义，P<0.05时有显著性差异。 结果： 1．血压变化 五组大鼠各时期血压比较：假手术组血压12周内基本维持在13.08±1.12-15.72±1.36(KPa)；高血压组自第2周起与假手术组比较有显著性差异(P<0.05)；RHRSP治疗组和非治疗组血压在肾动脉狭窄术后8周内差异无统计学意义(P>0.05)，但均显著高于假手术组(P<0.05)。第12周末，麝香酮、芦荟大黄素低剂量治疗组血压低于高血压组，前者(P<0.05)，后者(P>0.05)，但仍显著高于假手术组(P<0.01)。 2．血浆内皮素(ET)含量变化术后12周，高血压组ET含量与假手术组相比，差异有显著性(P<0.001)。麝香酮、低剂量芦荟大黄素治疗组ET含量降低，与高血压组相比差异有显著性(P<0.05)；而与假手术组相比，差异无显著性(P>0.05)。高剂量芦荟大黄素治疗组ET含量与假手术组相比，差异有显著性(P<0.05)；与高血压组相比，差异无显著性(P>0.05)。 3．大脑中动脉病理形态学改变术后12周，假手术组大鼠大脑中动脉(MCA)内皮完整，呈扁平状；中膜SMC呈梭型，排列紧密。高血压组可见大脑中动脉不同程度的管壁增厚及管腔狭窄；部分内皮细胞变性、脱落；中膜SMC排列紊乱，可出现片状坏死SMC。麝香酮组、芦荟大黄素低剂量组未见MCA明显结构破坏，管腔轻度狭窄；内皮细胞肿胀较高血压组轻；中膜SMC排列稍不整。芦荟大黄素高剂量组见内皮细胞肿胀明显，中膜SMC排列紊乱，细胞失去正常形态。 4．以α-SM-actin作为血管平滑肌标志，观察大脑中动脉结构参数的变化术后12周，高血压组与假手术组血管外径、管腔内径和壁腔比值相比，差异有显著性(P<0.05)。麝香酮组、低剂量芦荟大黄素组血管外径、管腔内径均大于高血压组，壁腔比值小于高血压组，差异有显著性(P<0.05)，但与假手术组相比，差异无显著性(P>0.05)。α-SM-actin染色后中膜平滑肌面积在RHRSP各治疗组和非治疗组中无显著差异(P>0.05)，但与假手术组相比均缩小，差异有显著性(P<0.05)。 5．大脑皮质微循环形态学改变假手术组，微血管在光镜、电镜下，血管形态规则，结构完整多呈圆形，管腔干净无沉积物，内皮细胞和基底膜形态完整连续。高血压组微血管形态结构受损，可见不同程度的管腔变形、狭窄，部分管腔内沉积物存在，及微栓子堵塞血管。内皮细胞水肿、空泡形成，基底膜连续性中断；管周间隙增宽。麝香酮、低剂量芦荟大黄素治疗组，多数RHRSP脑内仍可见微血管内皮细胞水肿、少量空泡形成，基底膜不规则；胶质细胞足突水肿等病变，但总体上较高血压组轻。 结论: 1．RHRSP术后12周，血压明显升高，血浆内皮素(ET)水平明显增高，提示存在内皮功能障碍。 2．RHPSP术后12周，大脑中动脉血管平滑肌细胞(VSMC)α-SM-actin的表达呈下降趋势，提示在高血压作用下大脑中动脉VSMC发生表型转化，由收缩型转为增殖型，存在血管重塑。 3．麝香酮治疗4周后可轻度降低RHRSP的收缩期血压(SBP)，降低血浆ET水平，使大脑中动脉血管平滑肌细胞(VSMC) α-SM-actin的表达增加，提示麝香酮可改善其血管内皮功能，并能一定程度上改善大脑中动脉(MCA)血管重塑。 4．低剂量芦荟大黄素治疗 4 周后可轻度降低RHRSP血浆ET水平，使大脑中动脉血管平滑肌细胞(VSMC)α-SM-actin的表达增加，提示其可轻度减轻平滑肌细胞的增殖，并具有一定的改善大脑中动脉(MCA)血管重塑的作用。但其无降压作用，说明血管重塑存在不依赖于血压增高的新机制。 5．RHPSP术后12周，存在有多种形式的微循环受损如内皮损伤、基底膜破坏、管腔狭窄、闭塞等，这些微循环的损伤也极有可能是微梗塞形成的基础。麝香酮及低剂量芦荟大黄素治疗可一定程度上减轻微血管损害，改善微循环。