构建纳米药物递送系统用于肿瘤免疫治疗研究

来源 :湖南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhonghuiling2009
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随着愈加严重的生态环境污染、加速的老龄化进程和不良的生活方式,人们罹患肿瘤的风险逐渐升高,这对人类生命健康带来了巨大威胁。目前治疗肿瘤有三种常规手段:手术切除、化学治疗和放射性治疗。然而这些传统手段都难以完全清除肿瘤细胞,带来了肿瘤复发和转移的隐患。肿瘤免疫治疗是指通过激活体内的免疫细胞,特异性地清除癌变细胞。该疗法具有特异性强、疗效持久和副作用小等优点,被认为是治愈肿瘤的终极手段。T细胞是免疫系统对抗肿瘤的主要武器,如何更好地活化T细胞是肿瘤免疫治疗的核心问题。T细胞的活化需要来自抗原提呈细胞(APC)的三类信号刺激:抗原信号、共刺激信号以及细胞因子信号。APC主要包括树突状细胞(DC)、巨噬细胞、B细胞。其中,DC是最为专业的抗原提呈细胞,通过捕获、加工、提呈抗原,实现初始T细胞的活化。因此,以DC为靶点来调控机体的肿瘤特异性免疫反应是一个非常重要的研究领域。目前,临床使用的DC疫苗主要是通过从患者体内提取单核细胞,在体外进行诱导培养,经过激活后重新注射回患者体内。虽然此类DC疫苗取得了一定的成效,但由于存在生产成本高、批次间差异大、工艺复杂等局限性。同时,重新注射回体内的DC还存在迁移能力和抗原呈递能力减弱等问题,在一定程度上限制了其实际应用。开发可在活体内靶向DC的纳米疫苗有望提高肿瘤免疫治疗效果,并推动DC疫苗的临床应用。虽然肿瘤免疫治疗受到广泛关注。然而,大量临床试验证实免疫疗法在大部分肿瘤患者体内效果甚微。研究发现,免疫治疗的临床效果与肿瘤微环境是密不可分的。首先,肿瘤内部的高密度、高间质压限制了外部药物的渗透。其次,在肿瘤的发生发展过程中,肿瘤内部逐渐形成免疫抑制性微环境,不仅抑制了抗肿瘤免疫细胞的作用,还诱导部分免疫细胞发展成促肿瘤表型。因此,如何克服肿瘤的药物递送屏障,并打破免疫抑制性微环境的影响,帮助机体重建抗肿瘤免疫能力,是肿瘤免疫治疗的一大议题。基于以上背景调研,本论文针对目前肿瘤治疗和免疫治疗存在的诸多问题,开发了一系列具有靶向功能的纳米药物,并成功地将它们应用于肿瘤的免疫治疗。针对目前DC疫苗制备存在的一系列问题,在第二章中,我们构建了靶向DC的纳米疫苗,并在体外对其靶向能力及免疫效果进行考察。实验结果表明,该纳米疫苗能够靶向未成熟的DC,并且能有效地刺激DC的成熟。在第三章中,我们通过构建小鼠模型继续对该纳米疫苗在体内的靶向能力及免疫效果进行考察。实验结果表明,该纳米疫苗在活体环境中,仍能靶向DC,并且具有良好的免疫治疗效果。考虑到肿瘤微环境对免疫治疗的影响,在第四章中,我们构建了一种靶向巨噬细胞的纳米药物递送系统,来克服肿瘤高密度、高渗透压的屏障,以提高纳米药物渗透到肿瘤内部的浓度。实验结果表明,包裹了金纳米棒的凋亡小体能被巨噬细胞特异性吞噬,并被高效地带到肿瘤球中,证明了巨噬细胞搭便车策略的可行性。在第五章中,我们构建了小鼠肿瘤模型、小鼠肿瘤转移模型以及小鼠复发模型来考察巨噬细胞搭便车策略在肿瘤免疫治疗中的效果。实验结果表明,纳米药物递送系统在活体中仍具有靶向巨噬细胞的能力,并且实现了在肿瘤内部的有效扩散。此外,该策略结合了金纳米棒良好的光热性能,能改善肿瘤免疫抑制微环境,促进肿瘤免疫反应,对抑制肿瘤生长和预后起到明显的效果。
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