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目的:在体外模拟肠缺血及缺血再灌注，探讨miR-146a及TLR4-TRAF6-NF-κB通路在其中的作用情况，为肠缺血的早期诊断及缺血相关性损伤之治疗提供理论基础。 方法:利用大鼠肠上皮细胞（intestinal epithelial cell，IEC-6），分别以1h、2h、3h建立不同时间缺血模型(I1h、I2h、I3h)，以缺血1h再灌注1h建立缺血再灌注模型（I1hR1h），再在I1h组及I1hR1h组中调控miR-146a的表达，利用实时定量PCR检测各组miR-146a、TLR4、TRAF6、RIP、XIAP的mRNA表达水平，利用流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western-Blot检测HIF-1a、TLR4、TRAF6、RIP、XIAP、SCOS-3、NF-κB、cleaved-Caspase-3蛋白表达。实验数据采用SPSS13.0统计软件进行统计分析，两样本均数比较采用t检验，多样本均数多重比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。 结果:(1) HIF-1a在缺血时表达显著增加(P＜0.01)，再灌注处理后其表达下调，迅速趋于正常水平。(2)肠缺血患者血浆中，miR-146a的表达显著下降(P＜0.01)。(3)缺血1h后miR-146a的表达显著降低（P＜0.01），以后随着缺血时间的延长而缓慢恢复，但始终低于正常;I1hR1h组的miR-146a水平高于I1h组(P＜0.05)，但仍显著低于正常(P＜0.05)。(4)细胞在缺血1h、2h、3h情况下的凋亡率会随着缺血时间的延长而逐渐升高，但缺血2h时与缺血3h时比较无统计学意义;I1hR1h组的凋亡率较I1h组更高(P＜0.05)。(5)在TLR4、TRAF6、RIP的mRNA水平与TLR4、TRAF6、RIP、NF-κB、cleaved-Caspase-3的蛋白水平中，具有相似的变化趋势，都是在缺血及缺血再灌注中显著升高(P＜0.05)，其中在缺血1h时升高得最明显（P＜0.01），以后随着缺血时间的延长及再灌注的发生较在I1h组的基础上有所下降，但始终高于正常(P＜0.05);XIAP的mRNA水平与SCOS-3、XIAP的蛋白水平变化中，都是在缺血1h时显著下降(P＜0.01），以后随着缺血时间的延长或再灌注的发生略有恢复，但始终低于正常(P＜0.05)。(6)在正常对照组中给予miR-146a的mimic或inhibitor处理后，可显著上调或下调miR-146a的表达(P＜0.01)，但对细胞凋亡率无明显改变，无统计学意义。(7)在I1h组中，用miR-146a的mimic处理后，miR-146a的水平显著升高(P＜0.01);而用miR-146a的inhibitor处理过后，miR-146a下降趋势不明显，无统计学意义。(8)在I1hR1h组中，给予miR-146a的mimic或inhibitor处理后，可显著上调或下调miR-146a的表达水平（P＜0.05）。(9)在I1h组及I1hR1h组中，用miR-146a的mimic处理，显著上调miR-146a的表达水平后，TLR4、TRAF6、RIP、NF-κB、cleaved-Caspase-3的上调被抑制，而SOCS-3及XIAP的上调被促进，各自与单纯I1h组、I1hR1h组比较具有明显差异(P＜0.05)，细胞凋亡率下降，说明miR-146a抑制细胞凋亡起保护作用。(10)在I1hR1h组中，用miR-146a的inhibitor处理，下调miR-146a的表达水平后，TLR4、TRAF6、RIP、NF-κB、cleaved-Caspase-3表达上调，而SOCS-3及XIAP表达下调，与单纯I1hR1h组相比具有明显差异(P＜0.05)，细胞凋亡率增加，说明抑制miR-146a过后加剧细胞凋亡起损伤作用。 结论:(1) miR-146a参与肠缺血及缺血再灌注过程，血浆miR-146a可望成为临床早期诊断小肠缺血的生物学标志;(2)TLR4-TRAF6-NF-κB信号通路参与肠缺血及缺血再灌注过程，介导细胞损伤;(3) miR-146a通过负调控TLR4-TRAF6-NF-κB信号通路抑制细胞凋亡，从而在肠缺血及缺血再灌注过程中起保护作用;(4)上调miR-146a或抑制TLR4-TRAF6-NF-κB通路的激活有望成为预防并治疗肠缺血相关性疾病的有效靶点。