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镉(Cadmium,Cd)和铅(Lead,Pb)是环境中普遍存在的重金属,可通过食物链降低畜禽的生产性能,并对脏器产生广泛性损伤。目前相关研究主要聚焦于单一重金属的毒性,但饲料中普遍存在多种重金属的污染的现象,特别是Cd和Pb联合污染较为常见。Cd和Pb重要的毒性机理是造成脏器的氧化损伤,并且肾脏是其共同的靶器官。二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DHM)和α-硫辛酸(α-lipoic acid,α-LA)具有良好的抗氧化活性。本试验通过动物试验研究Cd和Pb对肉鸡生产性能和肾脏的联合效应及可能的机理,并探究日粮中添加DHM和α-LA对缓解Cd和Pb联合毒性的作用。第一部分,日粮中镉和铅对肉鸡生产性能及肾脏损伤的影响试验选用168只1日龄罗斯308肉鸡,随机分为4组,每组7个重复,每个重复6只鸡,分别为对照组(基础日粮BD)、Cd组(50 mg/kg Cd)、Pb组(200 mg/kg)和Cd+Pb组(50 mg/kg Cd+200 mg/kg Pb)。试验期间记录体增重和采食量,计算料重比。于试验的第3、6周末,随机挑选从每个重复中随机抓取1只鸡进行屠宰,采集血液、肾脏、胸肌、皮肤、羽毛和胫骨样品。主要结果如下:1.Cd和Pb对肉鸡生产性能的影响:与对照组相比,第3周Cd组和Pb组肉鸡生产性能无显著差异(P>0.05),Cd+Pb组ADFI和ADG显著降低(P<0.05);第6周Cd组和Cd+Pb组ADFI显著降低(P<0.05),F/G显著升高(P<0.05);Cd+Pb组ADG显著降低(P<0.05)。Cd和Pb对肉鸡在第3周和第6周生长性能未表现出交互作用(P>0.05)。2.Cd和Pb对肉鸡组织残留及肾脏微量元素的影响:和对照组相比,Cd组和Cd+Pb组中Cd残留显著升高(P<0.05),其中Cd和Pb对羽毛中Cd残留交互作用显著(P<0.05)。与对照组相比,Pb组和Cd+Pb组Pb残留在肾脏、皮肤和羽毛中显著升高(P<0.05)。Cd组和Cd+Pb组肾脏Zn和Cu的含量显著增加(P<0.05),Pb组肾脏Mn的含量显著降低(P<0.05)。3.Cd和Pb对肉鸡肾脏损伤及胫骨指标的影响:肾脏病理学切片结果和超微结构显示,Cd和Pb对肉鸡肾脏造成了损伤,且Cd+Pb组损伤更严重,具体表现为肾小管上皮变性加重、间质淤血点增加等。与对照组相比,第3周Cd组TP含量显著升高(P<0.05),Pb组BUN含量显著升高(P<0.05),Cd+Pb组BUN、CREA和TG含量显著升高(P<0.05),且Cd和Pb对CREA和TG交互作用显著(P<0.05)。和对照组相比,第6周Pb组BUN显著升高(P<0.05),Cd+Pb组BUN和CREA显著升高(P<0.05)。Cd和Pb对肾脏的抗氧化系统也造成了损伤,与对照组相比,第3周Cd组CAT活性显著下降(P<0.05),Pb组MDA含量显著增加(P<0.05),Cd+Pb组CAT、SOD、T-AOC、GPx的活性及MT含量显著降低(P<0.05),且Cd和Pb对MT的含量具有交互作用(P<0.05)。与对照组相比,第6周Cd组CAT和T-AOC显著降低(P<0.05),Pb组CAT显著降低(P<0.05),Cd+Pb组的CAT、T-AOC和GPx显著下降(P<0.05)。与对照组相比,Cd+Pb组第6周胫骨Ca含量显著降低(P<0.05)。TUNEL结果显示,Cd组和Pb组出现程度较轻的细胞凋亡现象,Cd+Pb组肾脏细胞凋亡严重。4.Cd和Pb对PERK-ATF4通路的影响:与对照组相比,Cd组和Pb组Mfn2显著(P<0.05)下调,ATF4显著上调(P<0.05),Cd组MT表达量显著上调(P<0.05);Cd+Pb组的Mfn2显著(P<0.05)下调,GRP78、PERK、ATF4和CHOP显著(P<0.05)上调。Cd和Pb对Mfn2、GRP78和PERK表达交互作用显著(P<0.05)。第二部分,DHM和α-LA对Cd、Pb联合暴露下肾脏的解毒作用。试验选用168只1日龄罗斯308肉鸡随机分为4组,每组7个重复,每个重复6只鸡,分别为对照组(基础日粮BD)、Cd+Pb组(50 mg/kg Cd+200 mg/kg Pb)、DHM组(50 mg/kg Cd+200 mg/kg Pb+600 mg/kg DHM)和α-LA组(50 mg/kg Cd+200mg/kg Pb+400 mg/kgα-LA)。得出结果如下:1.DHM和α-LA对生产性能的影响:第3周DHM组和α-LA组生产性能与对照组和Cd+Pb组均无显著差异(P>0.05)。第6周,DHM组和α-LA组ADFI显著高于Cd+Pb组(P<0.05),F/G显著低于Cd+Pb组(P<0.05);与对照组相比,DHM组和α-LA组ADG、ADFI显著降低(P<0.05);2.DHM和α-LA对肉鸡残留及肾脏微量元素的影响:添加DHM和α-LA对于Cd和Pb在组织中的残留并无显著影响。第6周DHM组和α-LA组肾脏Cu、Zn含量显著(P<0.05)高于对照组但DHM组Zn含量显著低于Cd+Pb组(P<0.05)。3.DHM和α-LA对Cd、Pb造成的肾脏损伤缓解效果:肾脏病理和超微电镜结果发现添加DHM和α-LA可以在第3周缓解Cd和Pb联合作用下肾脏的损伤。第3周血清生化结果显示,和Cd+Pb组相比,DHM组和α-LA组BUN和TG含量显著下降(P<0.05),但未恢复至对照组水平;与Cd+Pb组相比,第6周DHM组和α-LA组BUN和CREA含量显著降低(P<0.05)且与对照组无显著差异(P>0.05)。添加DHM和α-LA可以缓解Cd+Pb对肾脏抗氧化能力的损伤,与Cd+Pb组相比,添加DHM和α-LA可以显著(P<0.05)提高第3周CAT、SOD活性;DHM组的T-AOC、GPx活性和MT含量显著低于对照组(P<0.05),α-LA组的T-AOC显著低于对照组(P<0.05)。与Cd+Pb组相比,第6周DHM组和α-LA组CAT、T-AOC和GPx活性显著增加(P<0.05),DHM组和α-LA组抗氧化能力与对照组均差异不显著(P>0.05)。和对照组相比,DHM组胫骨Ca含量显著降低(P<0.05)。TUNEL结果显示,添加DHM和α-LA后可以缓解Cd和Pb联合污染造成的肾脏细胞的凋亡。4.DHM和α-LA对PERK-ATF4通路的影响:和Cd+Pb组相比,DHM组的GRP78、PERK及e IF2α表达量显著下调(P<0.05);α-LA组的GRP78、PERK、e IF2α和ATF4显著下调(P<0.05);与对照组相比,DHM组的Mfn2、GRP78、PERK及e IF2α显著下调(P<0.05),CHOP表达量显著上调(P<0.05);α-LA组Mfn2和e IF2α显著下调(P<0.05),ATF4和CHOP表达量显著上调(P<0.05)。综上,得出结论如下:1)Cd和Pb使肉鸡生产性能降低,添加DHM和α-LA可以缓解Cd、Pb联合暴露对生产性能的影响;2)Cd和Pb在肉鸡组织中残留由高到低顺序分别为:肾脏>羽毛>皮肤>胸肌和羽毛>肾脏>皮肤>胸肌;3)Cd和Pb两者共同作用下加剧肉鸡肾脏氧化损伤程度,这可能是通过提高内质网应激PERKATF4通路基因加剧了肾脏的氧化损伤,添加DHM和α-LA可以增加抗氧化酶活性和降低PERK-ATF4通路基因表达缓解氧化损伤。