【目的】：通过GST-PDGFRα-N融合蛋白免疫雌性BALB／C小鼠，采用杂交瘤技术，建立能够稳定分泌高亲和力的抗GST-PDGFRα-N的杂交瘤细胞株。将复苏培养的杂交瘤细胞打入预先用石蜡处理过的经产鼠腹腔收集腹水，经过盐析粗纯后用ELISA、免疫组化、免疫沉淀、Western-Blot等方法对抗体进行鉴定。进一步通过竞争抑制ELISA方法与SP免疫组化方法分别对临床血清与病理切片进行检测，从而研究肿瘤PDGFR的表达情况。【方法】：通过GST-PDGFRα-N融合蛋白免疫8-10周龄雌性BALB／C小鼠，三次常规免疫，细胞融合前三天，进行一次腹腔加强免疫。取免疫鼠脾细胞与处于对数期的sp2／0，在37℃水浴的1ml 50％PEG4000下进行细胞融合。放于37℃5％CO2培养箱中在1×HAT下培养，7天后用1×HT换液继续培养。大约融合后10-14天通过间接ELISA进行双筛，筛选出的阳性孔采用有限稀释法进行单细胞的亚克隆，直至筛选出阳性率达100％、稳定分泌特异性抗体的阳性杂交瘤细胞株。大量扩增细胞并通过打经产BALB／C小鼠腹水制备抗体，经过饱和硫酸铵盐析粗纯化抗体。通过280纳米光吸收法对纯化后抗体的浓度进行测定。采用SDS-PAGE对抗体进行分子量和纯度的鉴定，间接ELISA方法检测抗体的效价，免疫组化和Western-Blot鉴定特异性。通过竞争抑制ELISA方法与SP免疫组化方法分别对临床血清与病理切片进行检测，从而研究血液与肿瘤组织中PDGFR的表达情况。【结果】：成功的建立了两株能够稳定分泌抗GST-PDGFRα-N融合蛋白的杂交瘤细胞株3B12F5和3C6H7C11，获得了高纯度的单克隆抗体蛋白浓度分别为7．03182mg／ml和4．21491mg／ml，抗体的效价分别为1：102400和1：25600，免疫组化和Western-Blot实验证实两株抗GST-PDGFRα-N单克隆抗体能够特异性的识别BIU87、U125细胞中的PDGFR。标记的3B12F5性能稳定，工作浓度为1：5000，加入甘油后工作浓度为1：2500。竞争抑制ELISA以及SP免疫组化证实PDGFR高表达于几类肿瘤患者的血清及肿瘤组织中。【结论】：成功的建立了两株能够稳定分泌高亲和力、高特异性的PDGFRα-N单抗的细胞株，通过小鼠体内扩增的腹水效价高，通过实验鉴定证明能够特异性识别细胞中的PDGFR抗原。通过竞争抑制ELISA检测方法以及SP免疫组化方法证实一些肿瘤组织高表达PDGFR抗原，显示出该抗原高表达与肿瘤的发生发展有密切关系。