目的:通过研究大鼠急性脊髓损伤后神经细胞的形态变化、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及其对巨噬细胞的趋化作用、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达变化,探讨脊髓继发性损伤的作用机制及其与损伤后神经修复之间的关系。 方法:成年Wistar大鼠60只,体重为(280±10)g,随机分为6组(10只/组),5组损伤组,1组为假手术组。每组2只作为HE染色标本,3只作为透射电镜标本,用于观察脊髓损伤后神经细胞凋亡形态;5只用于观察脊髓损伤后MCP-1、BDNF的表达变化规律及巨噬细胞的浸润情况。5组损伤组动物均在无菌手术下咬除T7—T10椎板,充分暴露T8、T9节段的胸髓,采用改良的WD击打法,将自制钢棒从高处落下,通过垫片击打于该段胸髓致损伤。假手术组动物仅行T7、T8椎板切除术。损伤的5组动物分别在实验后3、6、12、24、72小时开胸,暴露心脏和主动脉。使用灌流器,经左心室-主动脉插管,并剪开右心耳。每组3只大鼠做为透射电镜标本,先用生理盐水推注冲洗,待右心房流出液透亮时,再用3%戊二醛推注冲洗、滴注灌流固定,取出以伤段脊髓为中心的约长1cm的胸髓。标本浸泡于3%戊二醛脱水、固定,4℃冰箱保存;每组的2只作为HE染色标本、5只作为观察脊髓损伤后观察MCP-1、BDNF的表达变化及巨噬细胞的浸润情况的标本,先将生理盐水推注冲洗,待右心房流出液透亮时,再用4%多聚甲醛推注、滴注灌流固定。取出以伤段脊髓为中心的约长1cm的胸髓。标本浸泡于4%多聚甲醛灌流液中固定,4℃冰箱保存。每组动物分别行透射电镜、HE染色,观察神经细胞凋亡形态;其余行免疫组化SABC法,观察MCP-1、BDNF的表达变化及巨噬细胞的浸润情况。