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研究和分析 SVDV 基因组一级结构是深入研究 SVDV 的基础，通过基因重组技术表达 SVDV VP2 基因抗原区的蛋白，为建立以重组蛋白为检测抗原的猪水疱病诊断方法奠定了基础。本研究包括以下两方面的内容： 1.SVDV 基因组全序列分析 应用 RT-PCR 技术获得 SVDV HK’70 分离株覆盖全基因组的 6 个 cDNA片段，序列测定后得到全序列。此序列经计算机分析后表明，该毒株基因组全序列长度为 7401nt（polyA 尾巴除外），大开放阅读框架的长度为 6 555nt，编码一条由 2 185 个氨基酸组成的多聚蛋白。5’NCR 和 3’NCR（polyA 尾除外）长度分别为 743nt 和 103nt，1A，1B，1C，1D 的长度分别为 207nt，783nt，714nt 和 849nt，2A，2B，2C 的长度分别为 450nt，297nt 和 987nt，3A，3B，3C，3D 的长度分别为 267nt，66nt，549nt 和 1386nt。序列比较结果表明，HK’70 与已发表的 SVDVJ1’73，SVDV H/3’76，SVDV （Seerchurn.P 等测株），SVDV NET/1/92 等株的核苷酸序列同源性分别为 98.4%，98.2%，98.2%和 91.0%；与柯萨奇病毒 CVB1，CVB2，CVB3，CVB4，CVB5，CVB6 的核苷酸序列同源性为 76.0%～80.4%。与 SVDV J1’73，SVDV H/3’76，SVDV（Seerchurn.P 等测株），SVDV NET/1/92等毒株氨基酸序列同源性分别为 98.9%，98.9%，99.0%和 96.9%；与柯萨奇病毒 CVB1，CVB2，CVB3，CVB4，CVB5，CVB6 的氨基酸序列同源性为 88.4%～95.3%。 2.SVDV VP2 基因在大肠杆菌中的表达 应用 RT-PCR 技术，以 SVDV HK’70 为材料，扩增出结构蛋白 VP2 基因。酶切 PCR 扩增产物并与表达载体 pGEX 4T-1 连接，转化 BL21 菌体并提质粒，将经酶切，PCR 鉴定为阳性的重组质粒命名为 pGEX-VP2。检测结果表明，目的基因插入的位置、大小和读码框均正确，表达载体构建成功。将含有阳性质粒的BL21 菌液经 IPTG 诱导后进行 SDS-PAGE 分析，结果表明 VP2 基因在大肠杆菌中得到高效表达，表达量最大时目的蛋白占菌体总蛋白的 30%左右，Westrenblot检测表明该蛋白能与 SVDV 阳性血清结合，具有免疫活性。