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目的:研究miR-503靶向e IF4G对乳腺癌耐药株MCF-7/ADR药物敏感性的影响,e IF4G对多药耐药相关蛋白ABCB1,ABCC1,ABCG2的调控作用。方法:生物信息学软件预测并筛选能与e IF4G基因3′UTR靶向结合的miRNA;Western blotting方法检测细胞p-m TOR,p-4EBP1,ABCB1,ABCC1,ABCG2蛋白的表达;实时定量RT-PCR检测细胞ABCB1,ABCC1,ABCG2 m RNA的水平;MTT法检测细胞对阿霉素,紫杉醇,他莫昔芬的药物敏感性;流式细胞术检测细胞的凋亡;双荧光素酶活性检测法验证miRNA与e IF4G的靶向关系。结果:生物信息学软件预测结果显示miR-503与e IF4G基因3’UTR区第340-346号碱基位能互补配对,同时在327-331存在四个结合位点。Western blotting结果显示,与阿霉素敏感株MCF-7相比,ATP结合盒蛋白基因(ABCB1,ABCC1,ABCG2)在阿霉素耐药株MCF-7/ADR中高表达。浓度大于等于50 n M的雷帕霉素能降低MCF-7/ADR中p-m TOR,p-4EBP1,ABCB1,ABCC1,ABCG2蛋白的表达水平。miR-503能降低MCF-7/ADR细胞当中e IF4G,ABCB1,ABCC1,ABCG2蛋白的表达。siR-e IF4G下调MCF-7/ADR细胞当中e IF4G,ABCB1,ABCC1,ABCG2蛋白的表达。实时定量RT-PCR检测结果显示,在阿霉素耐药株MCF-7/ADR中,ATP结合盒蛋白基因(ABCB1,ABCC1,ABCG2)相对表达量为1940.08±36.64,31.19±2.82,9.64±0.54均显著性高于阿霉素敏感株MCF-7(ABCB1,ABCC1,ABCG2基因相对表达量分别为1±0.09,1±0.17,1±0.1),siR-e IF4G,miR-503mimics,能降低MCF-7/ADR细胞当中e IF4G m RNA的水平,但对MCF-7/ADR细胞当中ABCB1,ABCC1,ABCG2 m RNA的影响无统计学差异。MTT检测发现,MCF-7/ADR细胞对阿霉素,他莫昔芬,紫杉醇的药物敏感性较MCF-7细胞差,阿霉素处理组IC50分别为37.23±8.18μM、104.95±26.16μM;他莫昔芬处理组IC50分别为36.61±4.64μM、24.15±5.03μM;紫杉醇处理组IC50分别为3.23±0.76μM、11.52±6.58μM。联用RAPA使得MCF-7/ADR细胞对阿霉素,紫杉醇,他莫昔芬的敏感性较单用药物处理组增强,阿霉素处理组IC50分别为79.65±28.66μM、119.34±36.06μM;他莫昔芬处理组IC50分别为18.41±9.19μM、25.02±2.36μM;紫杉醇处理组IC50分别为4.80±1.62μM、14.23±10.84μM。miR-503能增加MCF-7/ADR细胞对阿霉素,紫杉醇,他莫昔芬的敏感性,阿霉素处理的未转染组、NC组、miR-503转染组和miR-503 inhibitor转染组的IC50分别为52.00±23.05μM、52.99±22.08μM、29.88±4.65μM、52.05±19.16μM;他莫昔芬处理的未转染组、NC组、miR-503转染组和miR-503inhibitor转染组的IC50分别为29.58±4.90μM、30.42±7.42μM、18.68±2.78μM、35.94±10.03μM;紫杉醇处理的未转染组、NC组、miR-503转染组和miR-503inhibitor转染组的IC50分别为5.99±3.00μM、3.83±1.32μM、2.53±0.77μM、6.84±3.31μM。用siRNA敲低e IF4G,MCF-7/ADR细胞对阿霉素,紫杉醇,他莫昔芬的敏感性增加,阿霉素处理的未转染组、NC组、siR-e IF4G组的IC50分别为51.62±20.05μM、86.04±57.47μM、37.61±18.82μM;他莫昔芬理的未转染组、NC组、siR-e IF4G组的IC50分别为15.98±2.61μM、22.20±6.04μM、16.23±2.48μM;紫杉醇处理的未转染组、NC组、siR-e IF4G组的IC50分别为16.73±6.56μM、5.76±1.48μM、3.77±0.82μM。流式细胞术检测结果表明,e IF4G siRNA,miR-503 mimics使细胞G1期延长,细胞的凋亡比例增加。双荧光素酶活性检测,结果显示miR-503能通过结合e IF4G基因3’UTR影响其荧光活性改变。在转染克隆有e IF4G基因3’UTR质粒的实验中miR-503组与空白组以及NC组相比较,绿色荧光蛋白表达明显降低。结论:1、miR-503能够靶向e IF4G基因,下调其m RNA和蛋白的表达水平;2、eIF4G能调控ABCB1,ABCC1和ABCG2蛋白的表达,从而影响乳腺癌MCF-7/ADR细胞对阿霉素,他莫昔芬,紫杉醇的药物敏感性;3、miR-503对阿霉素,他莫昔芬,紫杉醇敏感性的增强效应与对eIF4G基因的靶向下调有关。