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目的研究培养基中含有表皮生长因子(Epidermal growth factor ,EGF)条件下,前列腺癌细胞中miRNA-21和SATB1表达变化,以及这两者的变化与前列腺癌细胞由雄激素依赖性转变为雄激素非依赖性的相关性。方法选择雄激素依赖的前列腺癌细胞株LNCaP和雄激素非依赖的前列腺癌细胞株PC-3,应用去除雄激素和类激素物质的RPMI1640完全培养基培养细胞。添加不同浓度EGF(0μg/L、1μg/L和10μg/L)进行培养,通过CCK-8检测两种细胞贴壁后24h、48h和72h增殖能力;EGF为0μg/L时,通过FCM检测两种细胞转染miRNA-21 inhibitor前后细胞周期变化情况,判定转染是否成功; EGF为0μg/L和10μg/L时,通过RT-PCR检测转染miRNA-21 inhibitor前后两种细胞中AR mRNA和miRNA-21的表达变化,Western blot检测转染miRNA-21 inhibitor前后两种细胞中SATB1的表达变化。所有数据用均值±标准差( x_±s)表示,所有资料采用SPSS18.0统计软件包进行数据处理。结果一.贴壁后24h、48h、72h,LNCaP细胞和PC-3细胞在EGF为10μg/L时的吸光度值(分别为0.268±0.03、0.306±0.02、0.399±0.05和0.471±0.01、0.563±0.08、0.739±0.02)、EGF为1μg/L时的吸光度值(分别为0.249±0.04,0.279±0.03,0.352±0.04和0.358±0.07、0.517±0.012、0.66±0.14)与EGF为0μg/L时的吸光度值(分别为0.135±0.02,0.167±0.01,0.191±0.01和0.202±0.089、0.417±0.01、0.558±0.011)之间两两比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),且EGF为10μg/L时两种细胞在各时间点的吸光度值与0μg/L时比较明显升高,差异具有显著性(P<0.01),提示EGF为10μg/L时各时间点的细胞增殖能力明显强于EGF为0μg/L时的细胞增殖能力;在EGF相同浓度和相同时间点上,PC-3细胞的增殖能力均强于LNCaP细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。二. LNCaP细胞和PC-3细胞在转染miRNA-21 inhibitor前,处于细胞周期S期的细胞数量百分比分别为21.29%和15.23%,而转染后,处于细胞周期S期的细胞数量百分比分别为40.99%和53.25%,表明两种细胞转染miRNA-21 inhibitor成功。三.转染miRNA-21 inhibitor前,LNCaP细胞和PC-3细胞在EGF为10μg/L时AR mRNA的相对表达量(0.39±0.010和0.56±0.009)较EGF为0μg/L时的相对表达量(0.24±0.007和0.50±0.007)增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。LNCaP细胞和PC-3细胞在EGF为10μg/L时,转染miRNA-21 inhibitor后AR mRNA的相对表达量(分别0.38±0.010和0.56±0.006)与转染前(0.39±0.01和0.56±0.009)相比无明显变化,差异不具有统计学意义(P>0.05)。在EGF浓度相同时,PC-3细胞中AR mRNA的相对表达量高于LNCaP细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。四.转染miRNA-21 inhibitor前,LNCaP细胞和PC-3细胞在EGF为10μg/L时miRNA-21的相对表达量(0.67±0.037和2.34±0.248)较EGF为0μg/L时的相对表达量(0.32±0.011和1.94±0.059)增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。LNCaP细胞和PC-3细胞在EGF为10μg/L时,转染miRNA-21 inhibitor后miRNA-21的相对表达量(0.45±0.012和0.70±0.016)较转染前(0.67±0.037和2.34±0.248)明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。在EGF浓度相同时,PC-3细胞中miRNA-21的相对表达量高于LNCaP细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。五.当EGF浓度分别为0μg/L、10μg/L时,LNCaP细胞和PC-3细胞转染miRNA-21 inhibitor后SATB1的相对表达量(分别为0.14±0.006、0.19±0.018和0.19±0.005、0.26±0.014)较转染前SATB1的相对表达量(分别为0.18±0.002,0.21±0.012和0.29±0.005、0.37±0.046)减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。在EGF浓度相同时,转染miRNA-21前后,PC-3细胞中SATB1的相对表达量均高于LNCaP细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论一、EGF可以促进雄激素依赖的前列腺癌细胞株LNCaP和雄激素非依赖的前列腺癌细胞株PC-3的生长。二、EGF可以促进雄激素依赖的前列腺癌细胞株LNCaP和雄激素非依赖的前列腺癌细胞株PC-3中AR、内源性miRNA-21和SATB1的表达。三、miRNA-21 inhibitor能够抑制雄激素依赖的前列腺癌细胞株LNCaP和雄激素非依赖的前列腺癌细胞株PC-3内源性miRNA-21的表达。四、SATB1的表达变化与miRNA-21的变化相关联。五、AR、miRNA-21和SATB1之间可能存在关联性,并且EGF、AR、miRNA-21和SATB1可能参与了前列腺癌细胞由雄激素依赖性向雄激素非依赖性的转变过程。