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目的:热带无爪螨重组蛋白Blo t 21疫苗的特异性免疫治疗的效果分析,以期为热带无爪螨导致的螨性过敏性疾病的治疗提供新依据。方法:1、以分子生物学技术合成基因的方法分别合成基因Blo t 21的3个T细胞表位基因（35-60AA）、（65-90AA）、（98-127AA）。然后将其依次串联,合成重组基因,并命名为Blo t 21 T。将上述重组基因Blo t 21 T片段克隆入原核表达载体pET28a（+）中,合成重组表达载体pET28a（+）-Blo t 21 T。用限制性内切酶对空的原核表达载体pET28a（+）和重组表达载体pET28a（+）-Blo t 21 T进行双酶切鉴定。2、将合成的重组表达载体pET28a（+）-Blo t 21 T转入大肠杆菌BL21（DE3）中。使用不同浓度梯度的IPTG（0.2、0.4、0.6、0.8、1mmol/L）小剂量诱导表达重组蛋白,然后将表达后的蛋白进行SDS-PAGE电泳,检测其表达情况,选择目的蛋白表达最适的IPTG浓度,然后进行大量的目的蛋白表达及纯化,该纯化后的目的蛋白即为疫苗。3、以热带无爪螨变应原粗制提取液致敏小鼠,构建小鼠哮喘模型。将30只8周龄雌性小鼠随机分成3组,分别为A对照组、B哮喘组、C免疫治疗组。哮喘组和免疫治疗组腹部注射热带无爪螨变应原粗提液,然后雾化激发,其中C组最后3天雾化激发前给予纯化的重组蛋白Blo t 21 T疫苗进行特异性免疫治疗,最后一次雾化激发后,取小鼠眼球血、肺泡灌洗液、肺组织。利用ELISA试剂盒（酶联免疫吸附试验）检测血清中IgE、IgG2a抗体的浓度及BALF（肺泡灌洗液）中IFN-γ、IL-4、IL-13细胞因子的水平,和对肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞显微镜下计数,制作肺病理切片,观察肺部炎症病理表现。4、统计分析:本文所有统计分析均使用统计分析软件SPSS18.0。使用单因素方差分析的（LSD-t检验）统计方法分析免疫治疗组与哮喘组和对照组与哮喘组的各细胞因子和抗体统计学意义。设P<0.05时,有统计学意义。结果:1、限制性内切酶分析结果表明重组基因Blo t 21 T合成成功,碱基对数目与预期一致。2、SDS-PAGE电泳显示在IPTG浓度为0.6mmol/L时,目的蛋白有较为清楚的电泳条带,所以重组基因Blo t 21在IPTG浓度为0.6mmol/L时表达最优。3、纯化后的目的蛋白治疗哮喘小鼠后,ELISA试剂盒检测结果显示:血清中IgE的浓度,免疫治疗组明显低于哮喘组（P<0.05）;血清IgG2a抗体的含量免疫治疗组显著高于哮喘组（P<0.05）;哮喘组IgE的水平较之对照组高,有统计学意义（P<0.05）;哮喘组IgG2a的浓度较对照组低,差异有统计学意义（P<0.05）。BALF中IL-4、IL-13的水平免疫治疗组低于哮喘组（P<0.05）,而免疫治疗组的IFN-γ浓度高于哮喘组（P<0.05）;免疫治疗组的IL-4、IL-13水平高于对照组,有统计学意义（P<0.05）;免疫治疗组的IFN-γ水平较对照组低,有统计学意义（P<0.05）。显微镜下观察肺组织病理切片显示:经重组蛋白Blo t 21 T疫苗的治疗后,免疫治疗组的炎症程度减轻,症状得到改善,炎症细胞浸润得到缓解,增厚的支气管壁变薄。炎症程度哮喘组>免疫治疗组>对照组。结论:综合以上,表明我们成功合成了重组基因Blo t 21 T,且该目的基因在表达载体中实现了大规模的表达和纯化。重组基因Blo t 21 T的表达产物即疫苗有效的缓解改善了小鼠哮喘的症状。