【摘 要】
：
背景和目的 胰腺癌是一种恶性进展极快、预后差、诊断和治疗困难的消化道肿瘤,其发病率和死亡率逐年攀升。目前,以特异性基因的表达为导向的靶向治疗是胰腺癌疾病领域的研究热点。但由于肿瘤分化的差异性,目前仍没有一种单一的靶向治疗方案被证明是非常有效的。但相关生物标记物研究的不断进展给更多胰腺癌患者的疾病治疗带来了曙光。虽然胰腺癌的靶向治疗仍然存在许多障碍,但令人振奋的是,很多研究在破译胰腺癌的异质性方面取
论文部分内容阅读
背景和目的 胰腺癌是一种恶性进展极快、预后差、诊断和治疗困难的消化道肿瘤,其发病率和死亡率逐年攀升。目前,以特异性基因的表达为导向的靶向治疗是胰腺癌疾病领域的研究热点。但由于肿瘤分化的差异性,目前仍没有一种单一的靶向治疗方案被证明是非常有效的。但相关生物标记物研究的不断进展给更多胰腺癌患者的疾病治疗带来了曙光。虽然胰腺癌的靶向治疗仍然存在许多障碍,但令人振奋的是,很多研究在破译胰腺癌的异质性方面取得了不错的进步。所以,将常规治疗和靶向治疗相结合将是有效治疗这种致命疾病的关键。近年来的研究还发现环状RNA（circular RNA,circRNA）在胰腺癌细胞中起重要的调节作用,胰腺癌细胞（pancreatic cancer cells,PCCs）中circRNA的异常表达可以促进胰腺癌的发生和发展。然而,circRNA在癌症相关胰腺星状细胞（cancer-related pancreatic stellate cells,CaPSCs）的作用尚不清楚。因此,本研究旨在探究CaPSCs细胞通过circRNA/微小RNA（MicroRNA,miRNA）/靶蛋白轴促进胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,为胰腺癌的治疗提供新的策略。方法 在本研究中,我们采用组织块外植法和改良的酶消化密度梯度离心法从5例胰腺癌患者的癌组织中分离、纯化出CaPSCs细胞,从5例良性胰腺疾病患者的正常胰腺组织中分离、纯化出正常胰腺相关胰腺星状细胞（Normal pancreas-associated pancreatic stellate cells,Na PSCs）。将上述胰腺星状细胞（Pancreatic stellate cells,PSCs）与胰腺癌细胞Panc-1采用Transwell体系共培养后,使用CCK-8实验检测与不同的PSCs细胞共培养后的Panc-1细胞的增殖能力,筛选出对Panc-1细胞增殖能力促进作用最强的CaPSCs1细胞和对Panc-1细胞增殖能力促进作用最弱的NaPSCs1细胞。然后通过RNA高通量测序比较CaPSCs1细胞和NaPSCs1细胞之间的circRNA,miRNA和mRNA的表达谱。通过生物信息学分析选择候选circRNA/mi RNA/靶蛋白mRNA调控轴。接着在CaPSCs1细胞中沉默目的circRNA和过表达目的miRNA,分别通过RT-qPCR和Western blot检测circRNA,miRNA,靶蛋白mRNA及靶蛋白的表达。最后同时采用CCK-8实验、划痕实验和Transwell迁移/侵袭实验检测不同共培养组中Panc-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果 生物信息学分析中前3位差异表达最大的circRNA为chr7:154954255-154998784+,chr10:12081472-12120267+和chr10:76909966-77019099+,其中差异表达最大的circ RNA通过RT-qPCR再次验证,这3个circ RNA的表达趋势与测序结果一致,但chr7:154954255-154998784+在CaPSCs1细胞中表达上调最为显著。之后利用生物信息学分析从候选靶点中筛选出chr7:154954255-154998784+/miRNA4459/KIAA0513轴。沉默chr7:154954255-154998784+后,CaPSCs1细胞中mi RNA4459表达上调,KIAA0513表达下调。此外,与chr7:154954255-154998784+沉默的CaPSCs1细胞共培养后,Panc-1细胞的CCK-8实验、划痕实验和Transwell迁移/侵袭实验表明其增殖、迁移和侵袭能力下降。当miRNA4459在CaPSCs1细胞中过表达时,chr7:154954255-154998784+和KIAA0513的表达下调。此外,与过表达miRNA4459的CaPSCs1细胞共培养后,Panc-1细胞的CCK-8实验、划痕实验和Transwell迁移/侵袭实验表明其增殖、迁移和侵袭能力下降。结论 Chr7:154954255-154998784+可能通过CaPSCs细胞中的miRNA4459/KIAA0513轴促进胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,这可能成为未来胰腺癌患者重要的治疗靶点。
其他文献
研究背景:前列腺癌是男性癌症死亡的主要原因之一,特别是在西方发达国家。近年来,感染与肿瘤发生发展之间的关系已成为肿瘤研究领域的焦点。研究显示,在所有肿瘤中约有20%的病例是由微生物感染引起。越来越多的证据表明,感染也是促进前列腺癌发生发展的危险因素。Toll样受体（TLRs）是众所周知的模式识别受体家族,在介导宿主抗感染先天性免疫中起关键作用。不同的TLR特异性识别不同的病原微生物成分,其中TLR
背景:失眠作为最常见的睡眠障碍,影响着全世界大约10-30%的人口。失眠的特点是主观表述有入睡困难,维持睡眠或睡眠无法恢复,并伴有日间功能障碍。其中日间功能受损包括疲劳或全身不适,认知能力的减退,学习、工作或者社交能力下降,抑郁情绪或者焦虑情绪的出现等。慢性失眠障碍（chronic insomnia disorder,CID）存在空间学习记忆能力损害,但尚无理想的检测范式。近期的研究表明蓝色天鹅绒
目的:TS是胸苷酸生物合成和DNA复制的关键酶,抑制TS表达可以抑制肿瘤细胞的异常增殖。本研究旨在探讨胃癌组织中TS表达与临床病理因素、生存预后的关系及TS参与胃癌发生发展的相关分子机制,同时进一步研究血液中TS浓度变化对胃癌患者雷替曲塞腹腔用药最适给药时间的指导意义。方法:免疫组化法检测80例胃癌组织和癌旁正常组织中TS表达情况;q-PCR检测20例新鲜冰冻胃癌及对应癌旁组织中TS mRNA的表
高中教育的对象是有血有肉的学生,活生生的人,要深入了解、尊重学生;在教育学生的过程中,教师要用自己的德行引导学生,以身作则,树立教师的威信;在具体的班级管理中,要简单,深入学生心灵,从细节抓起,"因材施教"。
目的:本研究对临床诊断为急性冠脉综合征的住院患者采用Watch-PAT完成睡眠时相的检测,了解急性冠脉综合征患者的临床特征,探究其可能与睡眠时相存在的联系以及OSA对急性冠脉综合征患者预后的影响,为急性冠脉综合征病人的治疗提供新的思路。方法:入选2019年5月至2019年12月于安徽医科大学附属省立医院心内科住院的急性冠脉综合征的患者,共纳入195例患者在院期间均采用Watch-PAT完成床边睡眠
目的:糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病患者最严重的并发症之一,其发病机制复杂,越来越多的研究表明脂毒性在DN的发表机制中起着重要作用。棕榈酸（palmitate acid,PA）是体内游离脂肪酸组成中最丰富的饱和脂肪酸之一,肾小球系膜细胞为肾脏的固有细胞,对脂毒性敏感,也是糖尿病肾病的主要靶点。成纤维细胞因子21（FGF21）是FGF超家族的独特成员,在代谢中发
目的:慢性阻塞性肺疾病（COPD）是世界范围内导致死亡的主要原因之一,急性加重是造成这种情况的主要原因。据统计推测亚太地区慢性阻塞性肺病的患病率估计为6.2%,COPD患者中约46%的患者1年至少出现1次急性恶化,19%需要住院治疗。COPD被认为是静脉血栓栓塞（VTE）的中度风险因素,VTE是慢性阻塞性肺疾病患者全因死亡率的一个强有力的预测因子,尤其是在那些病情急性加重患者中。慢性阻塞性肺病的恶
目的:使用8色流式细胞术动态检测急性髓系白血病（AML）患者治疗后的微小残留病（MRD）水平,比较不同MRD变化情况患者的复发及生存差异,评价流式细胞术动态检测MRD的预后意义。方法:对282例初治缓解的AML患者进行回顾性分析,使用8色流式细胞术对患者进行MRD动态检测,通过受试者工作特性曲线（ROC）确定我中心MFC检测预测复发的MRD阈值,分析患者出现MRD阳性到临床复发的中位时间。比较患者
研究背景高细胞急性髓细胞白血病（hyperleukocytic acute myeloid leukemia,HL-AML）定义为初始白细胞计数≥100×109/L,常发生在5%-20%初诊的急性髓细胞白血病患者中。是一种临床急症,经常合并有高白细胞瘀滞,肿瘤溶解综合症（tumor lysis syndrome,TLS）和弥散性血管内凝血（disseminated intravascular co
目的 突发性感音神经性耳聋（Sudden sensorineural hearing loss,SSNHL）是一种突发性的、原因不明的单侧或双侧听力损失。听力损失是全球最常见的残疾原因,也是导致多年来因残疾而丧失生产力的第三大原因。在现代社会,SSNHL已成为一个严重的社会健康问题,虽然这种疾病的直接死亡率很低,但对患者生活质量的影响是巨大的。如何对患者实施最有效和最安全的治疗,最大限度地减少并发