IL-22对MFC细胞生物学行为及下游信号通路的影响

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目的:研究白细胞介素-22(Interleukin-22,IL-22)及其受体IL-22 R(IL-22R 1和IL-10 R 2)在鼠源前胃癌(MFC)细胞中是否均有表达,IL-22蛋白处理MFC细胞后对其生物学行为的影响,以及探讨IL-22对MFC细胞下游信号通路因子活化程度的作用。以此来分析IL-22对鼠源前胃癌(MFC)细胞生物学行为的作用机制。方法:(1)对小鼠前胃癌(MFC)细胞进行培养,通过q-PCR检测IL-22及其受体基因在小鼠前胃癌(MFC)细胞中的水平,western blot检测IL-22及其受体IL-22 R(IL-22 R 1和IL-10 R 2)在小鼠前胃癌(MFC)细胞中的表达情况;(2)在小鼠前胃癌(MFC)细胞培养过程中采用高(100 ng/ml)、低(1 ng/ml)两种浓度的IL-22进行处理,流式细胞术检测小鼠前胃癌(MFC)细胞的细胞凋亡情况,台盼蓝染色法检测小鼠前胃癌(MFC)细胞细胞的存活率,MTS法检测IL-22对小鼠前胃癌(MFC)细胞活性的影响,以及western blot检测IL-22对小鼠前胃癌(MFC)细胞中其下游信号通路中信号传导及转录激活因子3(Signal transducers and activators of transcription 3,STAT-3)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)基因的表达并分析其对小鼠前胃癌(MFC)细胞的影响。结果:(1)在小鼠前胃癌(MFC)细胞中,IL-22及其受体IL-22 R(IL-22 R 1和IL-10 R 2)基因均有表达;(2)小鼠前胃癌(MFC)细胞进行IL-22干预处理后,与空白对照组相比,无论是高浓度组(100 ng/ml)还是低浓度组(1 ng/ml),小鼠前胃癌(MFC)细胞的细胞凋亡数量均减少,并且随着浓度增高,细胞凋亡数目减少越明显;(3)经IL-22干预处理后,实验组细胞活性和存活率与空白对照比较无显著差异,高浓度组和低浓度组之间也无显著差异;(4)经不同浓度IL-22干预处理后,western blot检测发现其信号通路下游STAT-3、AKT和ERK三个蛋白的磷酸化水平增加,并且高浓度组高于低浓度组。结论:IL-22具有促进肿瘤恶性发展的作用,其作用机制可能通过与其受体结合后,促进下游STAT-3、ERK和AKT信号通路因子的磷酸化,激活下游信号通路,从而抑制癌细胞凋亡。
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