目的：　　随着生物科学技术的快速发展及各种新型疫苗研发的加速，人类对新型疫苗制剂的要求越来越严格。目前亚单位疫苗的免疫原性普遍较弱，为了提高疫苗的免疫原性，常在病毒性疫苗和多肽疫苗的研制中加入免疫佐剂，以增强疫苗对机体的免疫效力。佐剂是一类可以增强或改变机体对抗原产生特异性免疫应答的物质，其本身无或低免疫原性，不会或较小的引起机体免疫应答，并且佐剂能够有效降低疫苗产品中所含抗原成分或剂量，同时能够对体液、细胞免疫系统发挥有效的免疫激活作用，诱导更强的保护性反应，从而提高疫苗的有效性。　　本研究自主研制水包油佐剂SP01，并对其理化性质进行检测；依据《生物制品规程》要求，对其安全药理、急性毒性、过敏反应、溶血性、局部刺激性、长期毒性及致突变、致畸形、致癌性进行评价；并进一步与金黄色葡萄球菌灭活疫苗结合免疫BALB/C小鼠，检测疫苗对机体免疫应答效应，同时以金黄色葡萄球菌攻毒小鼠，观察SP01水包油佐剂对疫苗提高机体保护作用的影响，进而为今后新型佐剂的研制提供新的思路。　　方法本研究分为三部分：　　（一）SP01水包油佐剂制备及检定：将角鲨烯、聚氧乙烯蓖麻油、聚醚，磷酸盐缓冲盐水按照一定比例混合，应用高剪切分散乳化机，乳化得到乳白色均一液体，根据《佐剂质量评价标准》对佐剂外观、粒径、均一度、形态电镜观察、无菌、支原体、热源质等指标进行检测。　　（二）SP01水包油佐剂安全性评价：根据《生物制品规程》，通过对SP01水包油佐剂的安全药理、急性毒性、过敏反应、溶血性、局部刺激性、长期毒性及致突变、致畸形、致癌性的检测，对SP01水包油佐剂的安全性进行全面的评价。　　（三）SP01水包油佐剂免疫效能的研究：应用金黄色葡萄球菌灭活疫苗佐以SP01水包油佐剂，腹腔注射、肌肉注射、皮下注射等免疫方式对BALB/C小鼠进行免疫，通过对小鼠机体免疫应答效果及体外杀菌效果的检测，评价SP01水包油佐剂的作用。　　结果：　　制备的SP01水包油佐剂为乳白色均一液体，pH值为7.0，粘度为1.7，粒径为125.12nm，均一度为98％，透射电镜下呈圆球形，大小均一，粒径均匀。稳定性良好，无细菌、支原体生长，无热源质。在SP01水包油佐剂的安全性研究中，给予小鼠100μl、200μl、300μl、400μl SP01水包油佐剂静脉注射，小鼠全部存活，自主活动数无明显减少，且无剂量依赖性；SP01水包油佐剂500μl肌肉及静脉注射小鼠4小时内，其生理反应无明显变化，连续观察14天，小鼠的体重明显增加，各组织器官无病理变化；500μl SP01水包油佐剂静脉注射豚鼠未见过敏症状；SP01水包油佐剂对2%兔红细胞无溶血作用，不引起红细胞凝聚；日本大白兔耳缘静脉连续5天注射500μl SP01水包油佐剂，耳缘静脉切片显示无血栓形成，无内皮损伤及血管刺激性反应；SP01水包油佐剂连续1个月肌肉注射大鼠，大鼠体重未见明显下降，精神、食欲正常；小鼠肌肉注射500μl SP01水包油佐剂14天，注射部位组织病理切片无异常改变，无畸形，未见瘤变。由此证明：SP01水包油佐剂是安全的，无急性毒性、过敏反应、溶血、局部刺激、长期毒性及致突变、致畸形、致癌等不良发应。　　SP01水包油佐剂提高了对金黄色葡萄球菌灭活疫苗的体液免疫效果，其表现为总IgG明显升高；抗体亚型显示，SP01水包油佐剂促进疫苗诱导机体产生体液免疫应答效应；增强了体外杀菌率。上述结果显示，SP01水包油佐剂的使用，可以促进疫苗对机体产生更强的体液免疫应答效果。在攻毒后，小鼠体重及死亡率变化显示，SP01水包油佐剂对于细菌疫苗具有良好的载体作用，可以提高疫苗对机体的免疫应答效果。　　结论：　　本研究成功制备SP01水包油佐剂，通过其安全性、有效性的评价，证明SP01水包油佐剂符合国家对佐剂要求的质量标准，具有良好的安全性。与金黄色葡萄球菌灭活疫苗配伍，能够较好的诱导小鼠机体的体液免疫应答，提高了金黄色葡萄球菌灭活疫苗特异性抗体滴度及保护率。这些数据的获得为今后新型佐剂的研制提供理论基础。