双酚类物质对海水青鳉的毒性效应及盐度对双酚A毒性效应的影响

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双酚类物质(Bisphenols,BPs)是一类常见的内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals,EDCs),广泛存在于水体介质中,对水生生物有着巨大的潜在风险,引起了人们的高度关注。本研究以海水青鳉(Oryzias melastigma)为对象,通过转录组分析阐明了BPA、BPF、BPS和BPAF对海水青鳉仔鱼转录水平的影响,探讨了双酚A(BPA)、双酚F(BPF)和双酚AF(BPAF)单一和联合暴露(MIX)对海水青鳉成鱼肝脏和性腺的毒性效应。另外,探究了不同盐度下BPA对海水青鳉成鱼的影响和盐度对BPA毒性效应的影响。主要结果如下:1、使用0.05μM、0.5μM和5μM的BPs(BPA、BPF、BPS和BPAF)对海水青鳉仔鱼进行24 h、48 h和72 h短期暴露,结果表明,BPs短期暴露会促进海水青鳉仔鱼的心跳、抑制其游泳行为,改变神经发育相关基因(gap43、elavl3、gfap、mbpa和α-tubulin)的表达。另外,对暴露于5μM BPs 72 h后的海水青鳉仔鱼的转录组数据分析发现,4个处理组分别有1063、1324、1324和1900个差异表达基因(Different expression genes,DEGs),分别富集在174、187、190和198个KEGG通路中,包括脂肪酸降解、药物代谢-细胞色素P450、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、脂肪酸代谢、视黄醇代谢、碳代谢和心肌收缩等八个共有信号通路。在共有信号通路中,一些与脂质代谢(acaa2、tecra、apoa1)、解毒(fmo5、ugt2c1-like、gstt2)和碳代谢(alt2、fbp2)等过程相关的DEGs转录水平在BPs暴露后上调。2、暴露于200μg/L的BPA、BPF和BPAF及其等体积混合物MIX 70天后,成年海水青鳉的运动受到抑制,肝脏组织出现不规则的无细胞区域增加,肝细胞空泡化和核固缩等现象;BPs长期暴露影响了肝脏CAT和SOD等酶活水平,导致了氧化损伤;肝脏中脂肪酸生物合成、脂肪酸代谢和核糖体生物生成等多种生物途径发生改变,基因表达水平发生显著变化;BPs促进了海水青鳉卵巢的发育,但同时对卵母细胞造成了损伤,改变了下丘脑-垂体-性腺(Hypothalamic-pituitary-gonadal,HPG)轴相关基因(17βsd、3βsd和cyp11a等)的表达水平;另外,在BPAF暴露后,chgs和vtgs显著上调。3、在0、15和30盐度下暴露于200μg/L的BPA,成年海水青鳉雌鱼的运动在0盐度BPA暴露后受到明显的抑制,卵巢中早期卵母细胞减少,而15盐度BPA组的卵巢出现闭锁卵泡、空卵泡以及坏死细胞。另外,HPG轴(star、cyp11a和cyp19a等)、神经发育(gap43、elavl3和α-tubulin等)和神经肽(avp、avpr、oxtr和it-np)等相关基因的表达模式发生了改变。这些结果表明双酚类物质对海水青鳉仔鱼和成鱼都产生了不利影响,这种影响无论是在BPs浓度或者暴露时间维度上都不是单一的增强或者削弱,而是一种动态的影响,揭示了生物体对环境内分泌干扰物复杂的抗干扰特性。但总的来说,双酚类物质的短期或持续暴露对水生生物具有神经、肝脏和生殖毒性,有必要开展后续研究深入探讨双酚类物质对水生生物毒害的作用机制。
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