【摘 要】
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目的:研究cGAS-STING信号通路中关键蛋白干扰素基因刺激蛋白（STING）对人支气管上皮细胞自噬及凋亡的影响,为慢性阻塞性肺疾病的治疗提供新的思路。方法:沉默STING基因的BEAS-2B细胞中,以正常组做对照,用带绿色荧光的腺病毒（Ad V-GFP）感染细胞。通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测m RNA水平STING、β-IFN的表达。蛋白质印迹法（Western blot）检测
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目的:研究cGAS-STING信号通路中关键蛋白干扰素基因刺激蛋白（STING）对人支气管上皮细胞自噬及凋亡的影响,为慢性阻塞性肺疾病的治疗提供新的思路。方法:沉默STING基因的BEAS-2B细胞中,以正常组做对照,用带绿色荧光的腺病毒（Ad V-GFP）感染细胞。通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测m RNA水平STING、β-IFN的表达。蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞内STING、P62、LC3B及Caspase-3蛋白表达。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测β-IFN的表达。流式细胞术检测细胞凋亡。结果:⑴STING分子在BEAS-2B细胞中有表达,并且沉默STING基因后,β-IFN表达下调（p＜0.01）,自噬相关蛋白P62表达上调（p＜0.01）、LC3B-II/LC3B-I的比值下调（p＜0.01）。⑵人支气管上皮细胞感染Adv后,STING表达上调（p＜0.01）;沉默STING基因,Adv感染BEAS-2B后,自噬相关蛋白P62表达上调（p＜0.01）,LC3B-II/LC3B-I的比值减低（p＜0.01）,凋亡蛋白active caspase-3表达相应减低（p＜0.01）,流式细胞术检测细胞凋亡受抑制。结论:⑴腺病毒感染能诱导人支气管上皮细胞自噬增强,腺病毒联合CSE感染能协同增强细胞自噬作用;⑵沉默STING基因能抑制人支气管上皮细胞自噬;⑶cGAS/STING/IFN信号通路在腺病毒感染诱导的人支气管上皮细胞自噬、凋亡过程中可能发挥作用。
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