胡椒碱通过线粒体通路诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的机制研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiazaiyigeshishi
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研究目的:本实验旨在探讨胡椒碱对人胃癌细胞株BGC-823的抑制作用诱导及其验证其是否可能通过线粒体凋亡通路诱导凋亡;研究方法:①采用四甲基偶氮唑蓝显色法,检测胡椒碱对体外培养的人胃癌细胞株BGC-823不同浓度的增殖能力的抑制作用及其时间的相关性;②采用划痕实验法检测胡椒碱对体外培养的人胃癌细胞株BGC-823迁移能力的影响及其时间相关性;③采用小室侵袭实验检测胡椒碱对体外培养的人胃癌细胞株BGC-823侵袭能力的影响及其时间相关性;④采用流式细胞仪检测胡椒碱对人胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响及其浓度相关性;⑤采用罗丹明检测法胡椒碱对人胃癌细胞株BGC-823线粒体电位变化的影响及其浓度相关性;⑥采用RT-PCR检测法检测胡椒碱对人胃癌细胞株BGC-823线粒体凋亡通路上相关基因的表达及其浓度相关性;⑦运用Western法检测胡椒碱对线粒体凋亡通路相关蛋白表达的干预及其浓度相关性。研究结果:①胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823后,细胞的增殖的能力明显减小,并且呈浓度依赖性及时间相关性;②胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823后,人胃癌细胞株BGC-823细胞的迁移能力明显下降,并且呈现浓度依赖性及时间相关性;③胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823后,穿越transwell小室的细胞数量较对照组明显减少,其侵袭抑制率呈明显的浓度依赖性及时间相关性;④胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823 2 4h后出现明显的细胞凋亡,并呈一定的浓度依赖性;⑤胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823 24h后,线粒体电位明显下降,并呈浓度依赖性;⑥胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823 24h后,细胞线粒体通路凋亡相关基因Bax、Bak随着胡椒碱浓度升高,其表达量越高;Bcl-2、Survivin随着胡椒碱浓度的升高,其表达量越低;⑦胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823 24h后,线粒体凋亡通路相关蛋白Bax、 cleave-caspase9随胡椒碱浓度浓度升高,其表达量越高;Bcl-2、随着胡椒碱浓度升高,其表达量越低;研究结论:胡椒碱能抑制人胃癌细胞株BGC-823增殖,迁移及侵袭能力;胡椒碱可诱导人胃癌细胞株BGC-823细胞凋亡;胡椒碱诱导人胃癌细胞株BGC-823凋亡可能是通过线粒体通路实现的。
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