利巴韦林及主要代谢物在蛋鸡组织中残留消除规律研究

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我国是禽产品生产和消费大国,禽蛋产量多年来位居世界第一。由于禽类养殖集约化程度高,养殖密度大,但标准化管理水平较差,导致禽病情况相对比较严重,利巴韦林等禁用抗病毒药物常被违法使用,对人类病毒性疾病防治可能造成无效的风险隐患。目前,利巴韦林在蛋鸡体内的残留规律尚未明确,其原型及代谢产品在鸡肉、鸡肝及鸡蛋中的残留检测方法尚未建立,利巴韦林违法使用问题缺乏科学有效的监管手段,因此急需开展利巴韦林在蛋鸡组织中残留规律研究,并建立相应检测监管方法。本研究以京红蛋鸡为研究对象,建立了蛋鸡组织中利巴韦林及其主要代谢物的UPLC-MS/MS检测方法,开展了蛋鸡组织和鸡蛋产品中利巴韦林及主要代谢物的残留消除规律研究,确定了监测靶标物和靶组织,以期为禽产品质量安全风险评估和预警提供科学依据。主要研究内容和结果如下:1.蛋鸡组织中利巴韦林及主要代谢物的UPLC-MS/MS残留检测方法建立针对利巴韦林原型在蛋鸡组织中残留量低、转化率高的特点,采用超高效液相色谱-串联质谱法建立了鸡肉、鸡肝和鸡蛋中利巴韦林及主要代谢物TCONH2和RTCOOH的残留检测方法。样品采用乙腈水(v/v,9:1)提取,乙腈饱和正己烷除去脂类物质,固相萃取材料C18结合GCB进行固相分散萃取去除杂质,Agilent ZORBAXSB-Aq色谱柱(1.8μm,3.0×100mm)分离,超高效液相色谱-串联质谱法测定。结果表明:利巴韦林、TCONH2和RTCOOH在鸡肉、鸡肝和鸡蛋三种组织中线性关系良好,相关系数R2均大于0.99;三种物质回收率分别为83.5%~120.6%、75.9%~111.4%和 42.9%~58.9%;检出限分别为 0.54~1.54μg/L、0.04~1.26μg/L 和1.54~4.30 μg/L。经实际样品测定可靠有效。该方法进样分析时间短、操作简单、分离度好、回收率高,定量限和精密度符合基本要求,能够满足蛋鸡组织中利巴韦林及主要代谢物的残留检测。2.利巴韦林及主要代谢物在蛋鸡组织中残留消除规律研究以京红蛋鸡为研究对象,以30mg/kg体重剂量标准连续口服灌喂给药5天,研究利巴韦林及主要代谢物在鸡肉、鸡肝等组织中的残留消除特征。结果表明:利巴韦林在蛋鸡体内代谢迅速,分布广泛,原型及主要代谢物在鸡肉、鸡肝等组织中达峰时间(Tmax)均小于2h。不同的组织中药物残留分布情况不同,鸡肉中利巴韦林原型残留量大,最大残留浓度(Cmax)为402.97 μg/kg,鸡肝中代谢物RTCOOH的残留量最大,Cmax为9993.10μg/kg;鸡肝中利巴韦林原型及主要代谢物等3种药物的消除速度快,其中利巴韦林最后检出时间(Tlast)为24h,TCONH2和RTCOOH等两种主要代谢物的最后检出时间(Tlast)为48 h;鸡肉中3种药物消除速度慢,其中利巴韦林最后检出时间(Tlast)为60h,TCONH2最后检出时间(Tlast)为120h。说明鸡肉组织可以作为利巴韦林残留监测的靶组织,监测靶标物为TCONH2。3.利巴韦林及主要代谢物在鸡蛋产品中残留规律研究以京红蛋鸡为研究对象,以30 mg/kg体重剂量标准连续口服灌喂给药5天,研究利巴韦林及主要代谢物TCONH2和RTCOOH在鸡蛋产品中的残留规律。结果表明::利巴韦林和其主要代谢物进入鸡蛋产品的速度快,代谢产物TCONH2在停药后第一天即达到最大残留浓度1182.50μg/kg,利巴韦林和RTCOOH均在停药后第二天达到最大残留量;鸡蛋中TCONH2残留量大,消除速率也快,鸡蛋中TCONH2起始残留量比利巴韦林和RTCOOH残留量高出一个数量级,但在停药后5天即与利巴韦林和RTCOOH处于同一浓度水平;原型及两种代谢物在鸡蛋中残留时间均比较长,停药后第8天三种物质均仍有检出。说明蛋禽养殖中违禁使用利巴韦林会对禽蛋产品带来一定的安全风险隐患。
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