随着当今畜牧业的快速发展,现有的免疫增强剂存在着许多不足之处,难以达到满意的免疫效果,因此研究高效、安全廉价的新型免疫增强剂已成为亟待解决的问题。本研究在前期成功研制的芪藿糖注射液的基础上,研制了中药芪藿糖散,研究了芪蒮糖散的生产工艺和安全性,并筛选其最佳剂量,验证了其功效,旨在为芪藿糖散的开发应用提供理论依据。试验包括下面五个部分:试验Ⅰ.芪藿糖散生产工艺的研究 测定了芪藿糖散药液的干物质含量、最小喷雾体积和辅料的吸附能力。芪藿糖散药液干物质含量的测定结果表明,3份药液的干物质含量在12.1%～14.5%,辅料用量的比率应在85.5%～87.9%,因此确定辅料的用量为880 g。药液最小喷雾体积的测定结果表明,最小喷雾体积的比率在40%～55%,喷雾体积应大于550ml;辅料吸附能力的测定结果表明,喷入药液体积的合适比率在80%～260%,药液的体积应大于800ml,因此确定芪藿糖散药液的总体积为1000 ml。根据以上研究结果,确定了芪藿糖散生产工艺的关键参数为制成1000 ml药液,喷入到880 g二氧化硅中。试较Ⅱ.芪藿糖散的安全性研究 按照新兽药安全性研究指导原则,测定了芪藿糖散(AEP)的急性毒性、亚慢性毒性和对靶动物鸡的安全性。急性毒性试验结果显示,芪藿糖散的最大给药量为18000 mg·kg-1,表明芪藿糖散无毒;亚慢性毒性试验结果显示,各组小鼠在每次灌胃后会出现一过性不适反应,在整个试验期间未出现任何不良反应和发病死亡现象,在给药前及停药后第1、14天各组小鼠体重无显著差异,在停药后第1、14天各组小鼠的血液生理指标、血清生化指标均无显著差异、剖检和组织病理学检查未见明显的病理变化,表明芪藿糖散没有明显的亚慢性毒性;靶动物安全性试验结果显示,各组鸡在整个试验观察期间的临床体征均正常,未出现任何不良反应和发病死亡现象,在给药前和停药后第1、7天各组鸡的体重均无显著差异,在停药后第1天各组鸡的血液生理指标和血清生化指标均在正常范围之内、剖检均未见明显的病理变化,表明芪藿糖散对靶动物安全。试验Ⅲ：芪藿糖散刑量筛选试验 14日龄非免疫健康罗曼蛋公雏210羽随机均分为7组,除空白对照组外均用新城疫Ⅳ系苗滴鼻、点眼免疫,28日龄二免。在每次免疫的同时,芪藿糖散的5个剂量组每羽分别拌饲芪藿糖散125 mg、100mg、75 mg、50 mg、25 mg,每天1次,连续3天;空白对照组和免疫对照组不给药。分别于首免后第7、14、21和28 d,每组随机抽取6羽翼静脉采血,用β-微量法检测血清新城疫抗体效价。结果显示,在免疫后所有时间点,芪藿糖散各剂量组的血清抗体效价多显著高于免疫对照组和空白对照组,75 mg组在前三个时间点的抗体效价最高,在第四个时间点列第二位,表明芪藿糖散增强免疫的作用显著,75 mg/羽剂量的作用最强,可以推荐为临床应用剂量。试验Ⅳ.芪藿糖散拮抗鸡免疫抑制临床试验雏鸡饲养至11日龄取180羽随机均分为6组,除空白对照组外均肌肉注射8 mg·mL-1的环磷酰胺溶液0.5 ml,每天1次,连续3天。14日龄时,3个药物剂量组每羽分别拌饲芪藿糖散100 mg、75 mg、50 mg,药物对照组每羽饮服黄芪多糖口服液0.1 ml,每天1次,连续3天;空白对照组和模型对照组不给药。给药后每天观察鸡群的生长情况,分别于首次给药后第7、14、21和28 d,每组随机抽取6羽,称重、计算平均体重,心脏采血、用MTT法测定外周血淋巴细胞增殖(细胞A570值),分离脾脏、胸腺和法氏囊称重、计算免疫器官指数。结果显示,在给药后所有时间点,各给药组的细胞A570值均显著大于模型对照组,药物中剂量组最大;胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数多显著大于模型对照组,中剂量组最大;平均体重均显著重于模型对照组,中剂量组的体重最重。结果表明,芪藿糖散可以有效拮抗环磷酰胺诱导的免疫抑制,促进免疫功能、免疫器官发育和生长恢复到正常水平,中剂量的作用最为显著。试验Ⅴ.芪藿糖散增强鸡疫苗免疫效果试验 14日龄非免疫健康罗曼蛋公鸡300羽随机均分为6组,每组50羽,除空白对照组外,均用新城疫Ⅳ系苗滴鼻、点眼免疫,28日龄二免。在每次免疫的同时,药物的高、中、低剂量组每羽分别拌饲芪藿糖散100 mg、75 mg、50 mg,药物对照组每羽饮服黄芪多糖口服液0.1 ml,每天1次,连续3天;免疫对照组和空白对照组不给药。分别于首免后第7、14、21和28天,每组随机抽取6羽翼静脉采血,用β-微量法检测血清新城疫抗体效价;每组随机抽取4羽,心脏采血,用MTT法检测淋巴细胞增殖(A570值);每组随机抽取6羽,称重,计算平均体重。结果显示,在免疫后所有时间点,各给药组的血清抗体效价、细胞A570值和平均体重多高于或显著高于免疫对照组,药物中剂量组的抗体效价和细胞A570值均为最高,显著高于免疫对照组,平均体重与高剂量组交替最重,显著重于免疫对照组。表明芪藿糖散能显著增强鸡新城疫苗的免疫效果,并有一定的促生长作用,中剂量组的作用最强,推荐为临床应用剂量。