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目的：头颈部鳞状细胞癌是威胁人类健康的常见的恶性肿瘤之一,每年新发病例在持续增加,我国是世界上高发国家。尽管对头颈部肿瘤的治疗方法如手术治疗、放化疗不断改善,其五年生存率并未得到明显的提高。因此,有必要为头颈部肿瘤的治疗寻找新方法。有研究报道,精氨酸剥夺可以作为恶性实体瘤的治疗手段。重组人精氨酸酶(rhArg)是一种可以在人体内降解精氨酸的酶,有报道显示,它可以治疗某些精氨酸缺陷型的肿瘤,例如肝癌、肺癌和黑色素瘤。然而,它对于头颈部肿瘤的作用未见报道。自噬是通过降解损伤的细胞器和蛋白质,将降解产物循环利用的一个过程,以此来维持细胞稳态和细胞形态的完整性。研究表明,当细胞遭受缺氧、代谢紊乱以及细胞应激压力时可以诱导自噬的发生。自噬在肿瘤的形成及发展过程中起着复杂的作用。自噬既可以在肿瘤发展中起保护性的作用,也有研究报道称,自噬可以在肝癌细胞、乳腺癌细胞及卵巢癌细胞中导致肿瘤细胞发生自噬性细胞死亡。自噬在rhArg作用于头颈部肿瘤的作用未见报道。方法：我们利用MTT法检测rhArg对头颈部恶性肿瘤细胞如鼻咽癌细胞系(C666-1)、喉癌细胞系(Tu212)以及下咽癌细胞系(FaDu)的细胞毒性；单独作用及联合自噬抑制剂CQ和Baf Al对喉癌细胞系Tu212细胞的杀伤作用。利用透射电子显微镜(TEM)观察rhArg诱导Tu212细胞的自噬体产生。以Western blot法检测在C666-1、FaDu及Tu212细胞中ASS和OTC的表达情况；检测rhArg联合CQ和Baf Al对喉癌细胞系Tu212细胞的杀伤作用及自噬特异性蛋白LC3-Ⅱ的表达。利用流式细胞术检测联合自噬抑制剂CQ和rhArg对下咽癌FaDu细胞凋亡的影响。采用激光共聚焦显微镜(Confocal microscopy)检测自噬流的产生情况。还对自噬相关信号通路进行初步解析。结果：本课题首次发现了rhArg对C666-1细胞、FaDu细胞及Tu212细胞的细胞毒性,因为这三种细胞OTC表达的缺失。首次发现了rhArg诱导了喉癌细胞Tu212发生自噬,并且同时检测到了自噬流的产生。自噬在rhArg作用于Tu212细胞中起着保护性作用,抑制自噬可以增强rhArg对Tu212细胞的毒性。Akt/mTOR信号通路和Erk1/2信号通路可能参与了rhArg诱导的Tu212细胞产生的自噬中的分子调控机制。RhArg可能作为一种对头颈部肿瘤的潜在治疗药物,联合应用自噬抑制剂和rhArg能增强rhArg对Tu212细胞的敏感性,提高其杀伤作用,为头颈部肿瘤的治疗提供了一条新思路。结论：1.rhArg对C666-1细胞、FaDu细胞及Tu212细胞的细胞毒性,因为这三种细胞OTC表达的缺失。2.rhArg诱导了喉癌细胞Tu212发生自噬和自噬流,抑制自噬可以增强rhArg对Tu212细胞的毒性。