论文部分内容阅读
菊糖(inulin)是一种具有免疫活性的中药多糖,常作为益生元类饲料添加剂使用。匹多莫德(pidotimod)是一种人工合成的免疫刺激调节剂,通过刺激非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫产生效应。两者在兽医临床上的应用鲜有报道,为探索它们潜在的免疫增强或协同作用,开发新型复合免疫增强剂,本试验首先以免疫抑制小鼠为模型考察了菊糖和匹多莫德单独和联合应用的免疫调节作用,进而以小鼠脾脏淋巴细胞为模型,对两者免疫增强作用的机理进行了初步探讨。在此基础上,将菊糖和匹多莫德分别应用于动物实验研究其对新城疫疫苗免疫效果的影响,最后以攻毒试验评估了菊糖和匹多莫德合用对新城疫疫苗的免疫攻毒保护效果。试验结果汇总如下：1.以环磷酰胺腹腔注射法制作小鼠免疫抑制模型,探讨菊糖和匹多莫德单独或合用时对免疫抑制小鼠免疫机能的影响。与空白组相比,模型组小鼠的胸腺和脾脏指数减小,淋巴细胞增殖能力及腹腔巨噬细胞吞噬功能降低。与模型组相比,菊糖与匹多莫德单独使用或合用时都能减缓环磷酰胺的抑制作用,使免疫器官指数和腹腔巨噬细胞吞噬功能提高,血清1gG、IL-2、IFN-γ含量增加,且两种药物合用具有协同作用。2.在小鼠脾脏淋巴细胞培养液中,单独或同时加入菊糖和匹多莫德,采用RT-PCR法测定IL-2的mRNA的表达水平。结果表明,菊糖和匹多莫德均能显著促进脾脏淋巴细胞IL-2mRNA的表达,且合用效果优于单独使用。3.在使用新城疫Ⅳ系疫苗给肉鸡免疫的同时给予菊糖,探讨菊糖对疫苗免疫效果的影响。将60只1日龄黄羽肉鸡随机分成5组,各给药组分别肌肉注射(I.MH、I.ML)或点眼滴鼻(O.NH、O.NL)高、低2个剂量(1%、0.5%)的菊糖。通过免疫脏器指数、血清HI抗体效价的动态变化以及血清中IgG、IFN-y含量的测定来评价不同给药方式和剂量对机体免疫功能的影响。结果显示,4个药物试验组鸡的HI抗体效价水平及IgG含量均显著高于对照组,且以肌注低剂量组(0.5%)的效果较好,说明菊糖对新城疫Ⅳ系疫苗有明显的免疫增效作用。4.在使用新城疫Ⅳ系疫苗给肉鸡免疫的同时给予匹多莫德,通过免疫脏器指数、血清HI动态变化及血清中IgG、IFN-γ、IL-2含量的检测,研究匹多莫德对新城疫Ⅳ系疫苗免疫效果的影响。结果表明,3个药物试验组鸡的HI效价、IgG、IL-2含量均高于免疫对照组,其中高、中剂量组(400mg·kg-1、200mg·kg-1)的IgG、IL-2含量显著高于对照组,且中剂量组的HI效价较对照组有显著提高,说明匹多莫德(200mg·kg-1)对新城疫Ⅳ系疫苗有较强的免疫增效作用。5.在新城疫Ⅳ系疫苗给肉鸡免疫的同时给予菊糖和匹多莫德,并于免疫后用ND强毒株攻毒,评估药物对疫苗免疫的保护效果的影响。结果表明,与免疫攻毒对照组相比,菊糖和匹多莫德均降低了发病率,而联合给药组的免疫保护率达100%,比免疫对照组提高25%。3个给药组在免疫或攻毒后各个时间点的HI抗体效价均较疫苗对照组显著升高,并能显著促进T淋巴细胞增殖。此外,联合给药组还使IgG、IL-2及TNF-α水平均显著提高。这说明合用菊糖(0.5%)与匹多莫德(200mg·kg-1)能明显提高对新城疫Ⅳ系疫苗的免疫保护效果,且联合应用效果最好。