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目的:通过临床资料分析及建立癌因性疲乏(Cancer-related fatigue,CRF)肺癌裸小鼠模型,评价正元胶囊防治由肿瘤本身及化疗所引起的CRF的疗效,并明确中药复方正元胶囊缓解CRF的作用机制。方法:1.临床研究部分:使用Piper疲乏修订量表、自制中医辨证表,对191例CRF患者的疲乏程度与中医证型进行分析,结合我科既往研究结果,探讨正元胶囊防治癌因性疲乏的中医理论依据。2.动物实验部分:建立A549肺腺癌移植瘤裸小鼠模型。180只裸小鼠,随机抽取20作为正常对照(NC)组,不接种A549细胞,其余为接种A549细胞。接种完后,当瘤块长到50mm3-100mm3(接种后第7天)的时候,随机分为8组,每组20只。全部小鼠分为9组,即正常对照(NC)组、癌模型(TC)组、正元胶囊低剂量(ZD)组、正元胶囊中剂量(ZZ)组、正元胶囊高剂量(ZG)组,顺钼(P)组,顺铂+正元胶囊低剂量(LD)组、顺钼+正元胶囊中剂量(LZ)组、顺铂+正元胶囊高剂量(LG)组。中药(Z)组包括三个剂量亚组(ZD、ZZ、ZG组),联合(L)组包括三个剂量亚组(LD、LZ、LG组)。参考药物等效剂量公式,设定正元胶囊低剂量组给药剂量为0.45g/kg,中剂量组为0.9g/kg,高剂量组为1.8g/kg,灌胃,每天1次。顺铂的给药剂量为5mg/kg,腹腔注射,每3天一次。分组后(A549细胞接种第7天)开始给药,每天一次,连续21天。正常对照组和癌模型组给予相应体积的生理盐水灌胃。通过观察并记录实验过程中小鼠的一般情况、体重、瘤体体积,并进行力竭游泳实验、悬尾实验、旷场实验,检测肝糖原含量,评价正元胶囊防治癌因性疲乏的疗效;运用流式细胞技术、瑞姬氏染色、ELISA、细胞因子抗体芯片技术,检测外周血细胞计数、骨髓有核细胞计数、骨髓细胞涂片、细胞因子、皮质酮、T3、T4等,初步阐明正元胶囊防治CRF的作用机制。结果:1.临床研究表明,脾气虚出现率最高,占80.6%,其次为肾气虚,占43.5%;有脾阳虚、肝气郁结的患者疲劳程度偏重,疲乏得分偏高(P<0.05);有肾阳虚、肾气虚的患者疲劳程度偏重,疲乏得分偏高(P<0.001)。2.正元胶囊对CRF小鼠的药效学研究(1)正元胶囊对荷瘤小鼠一般情况的影响干预前,各组小鼠一般情况,包括体重均衡。干预3周后,小鼠一般情况从相对较好到差依次为NC组、ZD组、ZZ组、ZG组、TC组、LZ组、LD组、LG组、P组。荷瘤小鼠体重,NC组>TC组(P=0.023),L组>P组(P=0.024),表明正元胶囊能缓解化疗所致的CRF小鼠体重减轻。(2)正元胶囊对荷瘤小鼠躯体性疲劳的影响不同组小鼠在干预前力竭游泳时间均衡,干预18天时,TC组较NC组力竭游泳时间缩短(P<O.001);Z组各剂量亚组时间均较TC组延长(P<0.001);L组各剂量亚组时间均较P组明显延长(P≤0.001);L组各剂量亚组时间较T(组延长(P<0.05);LG组较LD组(P=).001)、较LZ组(P=0).017)游泳时间均延长。正元胶囊能延长肿瘤及化疗引起的CRF小鼠力竭游泳时间缩短,缓解躯体性疲劳;联合化疗时,高剂量组游泳时间最长,即高剂量正元胶囊缓解顺钼化疗引起的躯体性疲劳效果更佳。肝糖原的检测结果表明,TC组与NC组间无统计学差异(P=0.360),Z组肝糖原较TC组上升(P<0.001),L组较P组上升(P<0.001),L组较TC组上升(P=0.015)。正元胶囊能增加未化疗及接受化疗的CRF小鼠的肝糖原储备,有助于缓解疲劳。(3)正元胶囊对荷瘤小鼠精神性疲劳的影响悬尾实验表明,TC组不动时间较NC组延长(P=0.031)。Z组较TC组显著缩短(P<0.001),L组较P组显著缩短(P<0.001)。正元胶囊能缩短肿瘤及化疗所致的悬尾不动时间延长。旷场实验表明,NC组总运动距离(P=0.040)、外周格运动距离(P=).039)、平均速度(P=0.040)均高于TC组,中央格运动距离(P=).046)低于TC组,休息时(P=0.351)、大便粒数(P=0.228)两组间无差别。Z组中央格运动距离较TC组明显缩短(P<0.001)。L组总运动距离(P=0.018)、外周格运动距离(P=).002)、平均速度(P=0.017)较P组上升,中央格运动距离(P<0.001)较P组显著下降。休息时间在各组荷瘤小鼠间并未发现有明显差异。大便粒数,Z组最多,P组最少。正元胶囊能改善CRF小鼠的旷场运动情况。(4)正元胶囊对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用P组(P=).001)、L组(P<0.001)、Z组(P=0.030)的瘤重较TC组均有减轻,Z组、L组、P组的抑瘤率分别为26.9%、60.0%、57.1%。干预19d时,P组瘤体体积小于TC组(P=0.019)、L组瘤体体积小于TC组(P<0.001)。正元胶囊能在一定程度上抑制肿瘤生长,与化疗药物顺铂配合,能进一步缩小肿瘤,提高抑瘤率。3.正元胶囊对CRF小鼠造血及免疫功能的影响外周血WBC计数、HGB含量,骨髓有核细胞计数,均表现为L组>P组(P<0.001);未发现正元胶囊对RBC、PLT计数有影响。血清中细胞因子含量:EP0水平,Z组>TC组(P=0.049),L组>P组(P=).038)。G-CSF水平,L组>P组(P=0.043)。IL-3水平,LD组>P组(P=0.001),Z组各亚组较TC 组上升(P<0.05),ZD 组>ZG 组(P=0.003),LD 组>LZ 组(P<0.001)。TNF-α水平,ZG 组较 TC 组下降(P=).004),LZ 组(P=0.013)、LG 组(P=).010)较 P 组下降,ZG 组较 ZD 组(P=).05)、ZZ 组均有下降(P=).024),LZ 组(P=).026)、LG 组(P=).021)均较LD下降。IL-6水平,ZZ组、ZG组均较TC下降(P<0.001),LD组、LZ组、1LG组均较P组下降(P<0.001),ZZ组、ZG组较ZD组均有下降(P<0.001),LZ组较LD组(P<0.001)、LG组(P=0.017)均有下降。IL-2水平,Z组各剂量亚组IL-2水平较TC组均上升(P<0.05),且随着中药剂量上升,IL-2的上升幅度增大;LZ组和LG组IL-2水平均高于P组(P<0.001),且中药剂量越高,IL-2的上升幅度越大。以上结果表明正元胶囊能提高肿瘤及化疗所致CRF小鼠血清EPO水平下降;提高化疗所致的外周血白细胞、血色素下降,骨髓有核细胞计数减少,血清G-CSF水平降低;提高血清IL-3水平,且低剂量组效果更佳;降低血清TNF-αα水平,但最佳剂量未能确定;降低血清IL-6水平,且中剂量组效果更佳;还能提高血清IL-2水平,且IL-2水平随着中药剂量的上升而上升。未发现正元胶囊对血清IL-1 β水平有影响。此外,正元胶囊能增加化疗后CRF小鼠的脾脏指数,表现为L组脾脏指数较P组上升(P=0.013)。4.正元胶囊对CRF小鼠内分泌功能的影响血清T3水平,Z组>TC组(P<0.001)、L组>P组(P<0.001)。血清T4水平,Z组>TC组(P=0.002)。正元胶囊能提高CRF小鼠血清T3、T4水平;提高化疗后CRF小鼠血清T3水平。未发现正元胶囊对血清皮质酮有影响。结论:1.CRF主要涉及脾、肾,与肺、肝相关,脾气不足、肾精亏虚、痰瘀毒结可能是CRF的病机所在。正元胶囊能益气健脾、补肾填精,兼软坚散结,可针对CRF的病机治疗。2.正元胶囊能缓解CRF小鼠的躯体性及精神性疲劳,从而防治癌因性疲乏;提高CRF小鼠的肝糖原储备是正元胶囊防治CRF的作用机制之一。3.改善造血及免疫功能是正元胶囊防治CRF的作用机制之一。4.改善甲状腺功能是正元胶囊防治CRF的作用机制之一。