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目的:阿霉素（Dox）是一种广谱抗癌药物,它对不同种类不同时期的肿瘤细胞都有很好的抑制作用,但同时也具有较强的心脏和脊髓毒性,因此被作为二线药物使用。硫酸软骨素（CS）是一种自然多糖,存在于哺乳动物的细胞外基质和细胞表面,它有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等优良特性,在体内具有良好的生物相容性和非免疫性。CD44分子是一种存在于细胞膜表面的蛋白质分子,它在正常细胞表面处于相对静止的状态,在肿瘤细胞表面表达高度活跃,因为常被用作给药靶点。研究表明,CS可以与CD44分子结合,使得CS具有肿瘤靶向性。本实验拟采用CS修饰Dox,赋予Dox CD44靶向性,然后采用溶剂挥发法与PLGA形成新的具有CD44靶向性的纳米粒子,使所得药物不仅具有肿瘤细胞的靶向性,且更易到达肿瘤细胞内部,进入细胞核发挥疗效。在增强Dox药效的同时降低其毒副作用。方法:1.采用纯化降解后的CS对Dox进行修饰,合成硫酸软骨素-阿霉素（CS-Dox）,然后采用红外光谱法（FT-IR）、核磁共振波谱法（1H-NMR）、热重-热差分析法（TGA/DSC）、透射电镜（TEM）以及粒径分布测定仪对CS-Dox进行表征。2.对Dox、CS-Dox的PLGA纳米粒的制备方案进行优化,确定纳米粒的最优制备方案,制备空白PLGA纳米粒、Dox-PLGA纳米粒与CS-Dox-PLGA纳米粒,采用透射电镜（TEM）以及粒径分布测定仪对纳米粒进行表征。3.以小鼠海马神经元HT22细胞为正常细胞模型,考察修饰后的CS-Dox对正常体细胞的毒副作用的情况;以人脑胶质瘤U251细胞为细胞模型,采用CCK-8的方法考察Dox、CS-Dox及其PLGA纳米粒对U251细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察Dox、CS-Dox及其PLGA纳米粒在U251细胞中的摄取和转运以及CS-Dox及其PLGA纳米粒对肿瘤细胞的CD44靶向性。4.建立荧光法测定大鼠血浆中Dox含量的方法。采用此法检测大鼠血浆中的Dox含量,并进行药代动力学分析。利用荧光分光光度法比较小鼠组织中Dox含量并进行分析。结果:1.纯化降解后的CS对Dox进行修饰,合成硫酸软骨素-阿霉素（CS-Dox）,通过红外光谱、核磁共振谱结热重-热差分析结果确定CS通过酰键与Dox主链结合。合成后的CS-Dox胶束外观呈球形结构,形态规则,水合粒径在120 nm左右,粒径大小均一,分布均匀,其CMC约为0.0184 mg/mL,当CS-Dox浓度大于0.0184 mg/mL时,CS-Dox在溶液中成胶束形态。2.确定Dox纳米粒最优制备方案,并制备空白纳米粒、Dox-PLGA纳米粒与CS-Dox-PLGA纳米粒,三种纳米粒粒径均分布在150 nm以内,PDI较小,大小适中且均一,形态规则均呈圆球形,分布均匀,无黏连。3.CS-Dox对正常细胞的毒性低于Dox。Dox、CS-Dox及其纳米粒对U251细胞的增殖均有较好的抑制作用,但CS-Dox-PLGA对U251细胞抑制作用比Dox及其纳米粒更强。CS-Dox相较于Dox更易于进入细胞内,其纳米粒CS-Dox-PLGA更易进入细胞核内部;经过CS预孵育细胞后,CS-Dox及其纳米粒的进入细胞的能力明显减弱。4.建立了荧光法测定大鼠血浆中Dox含量的方法,此方法简单准确,方便快捷。采用此法检测血浆中的Dox。药物进入体内后,血液中Dox浓度会随时间呈现递减的趋势。CS-Dox及CS-Dox-PLGA纳米粒组的血药面积AUC0-24和药峰浓度Cmax高于其他几组。CS-Dox可以更多被吸收,疗效增强。药物在进入体内后,主要集中到肝脏、肾脏进行代谢。CS-Dox可以降低Dox在心脏的分布,同时血浆中的分布提高。结论:CS修饰Dox,使药物不仅具有Dox的抗肿瘤活性,同时具有CD44分子靶向性,使得药物可以特异性的作用到肿瘤细胞。将药物制备成PLGA纳米粒,使得药物可以更容易进入细胞核,发挥其抗肿瘤作用。同时增强了药物在体内的循环时间,降低药物对心脏的毒副作用。