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第一部分TNF-α抑制成熟3T3-L1脂肪细胞分泌RBP4目的:观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对体外培养的成熟3T3-L1脂肪细胞分泌视黄醇结合蛋白4(RBP4)的影响。方法:体外培养3T3-L1细胞,待细胞完全融合后两天,诱导分化为成熟脂肪细胞,使用不同浓度的重组TNF-α干预,采用放射免疫分析法检测干预后不同时间成熟脂肪细胞RBP4的分泌量。结果:1.不同浓度TNF-α(0.2、1.0、5.0、10ng/ml)对脂肪细胞RBP4的分泌均有抑制作用,其抑制效应呈剂量依赖性:随着TNF-α浓度的增加,RBP4水平降低越加明显。2.各实验组随着干预时间延长,RBP4虽有降低之趋势,但组内各时间点差异无统计学差异。3.二元回归分析提示TNF-α对RBP4有影响。结论:TNF-α能抑制成熟脂肪细胞RBP4的分泌,其抑制效应有剂量依赖性,而与干预时间无关。第二部分PGC-1α与成熟脂肪细胞分泌RBP4的相关性研究目的:观察过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子1α(PGC-1α)及其与TNF-α联合对体外培养的成熟3T3-L1脂肪细胞分泌视黄醇结合蛋白4(RBP4)的影响。方法:体外培养3T3-L1细胞,待细胞完全融合后两天,诱导分化为成熟脂肪细胞,使用重组PGC-1α腺病毒,对照病毒,以及重组TNF-α(10ng/ml),TNF-α联合PGC-1α腺病毒干预,采用放射免疫分析法检测24小时后成熟脂肪细胞RBP4的分泌量。结果:1.各干预组均能导致成熟脂肪细胞RBP4分泌的降低。2.对照病毒组和PGC-1α腺病毒组引起RBP4的降低,两组间差别无统计学意义。3. TNF-α组和TNF-α联合PGC-1α腺病毒组两组减少脂肪细胞分泌RBP4,差别无统计学意义。4.两含有TNF-α组和两病毒组对RBP4的影响有统计学差异。结论:PGC-1α对成熟脂肪细胞分泌RBP4无影响,TNF-α能抑制成熟脂肪细胞RBP4的分泌,两者对RBP4分泌的影响无相互作用。