【摘 要】
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本研究将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别以6μg基因枪轰击和200μg、100μg、50μg肌肉注射以及100μg+100μg猪白介素2真核表达质粒(p
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本研究将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分别以6μg基因枪轰击和200μg、100μg、50μg肌肉注射以及100μg+100μg猪白介素2真核表达质粒(pcDNA-IL-2)联合肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间分别取各组BALB/c小鼠胃、肠、肝、脾、肾、心、肺、免疫部位肌肉和脑等组织器官。通过PCR、原位杂交、原位PCR以及免疫组织化学方法检测ORF5基因疫苗以及ORF5基因疫苗表达产物在BALB/c小鼠体内的动态分布规律。结果表明:①液相PCR比原位杂交和间接原位PCR检测的灵敏度高:②间接原位PCR比原位杂交灵敏度高,检测到基因疫苗在被免疫BALB/c小鼠中存留时间更长并且检测到杂交信号更强;③猪白介素2真核表达质粒能延长ORF5基因疫苗在被免疫BALB/c小鼠肌肉中存留时间多达30d;④在肌肉注射ORF5基因疫苗组的BALB/c小鼠所取组织中,基因疫苗的剂量和基因疫苗在组织中的存留时间呈现正相关关系;⑤基因枪轰击组虽然基因疫苗轰击免疫的剂量很小,然而在被免疫的BALB/c小鼠中存留时间也很长,达到120d;⑥虽然基因枪轰击基因疫苗剂量较少,基因枪轰击组检测到的基因疫苗表达产物的量却超过同期肌肉注射组基因疫苗表达产物的量,同时在多种组织中基因疫苗都得到表达,这证明了基因枪轰击和肌肉注射虽然都是ORF5基因疫苗良好的免疫途径,但是基因枪轰击免疫要优于肌肉注射免疫;⑦猪白介素2真核表达质粒同ORF5基因疫苗联合肌肉注射组比同期肌肉注射组基因疫苗表达产物的量大,说明猪白介素2真核表达质粒同ORF5基因疫苗肌肉注射免疫效果优于单独ORF5基因疫苗肌肉注射免疫效果,白介素2是ORF5基因疫苗良好的免疫佐剂;⑧肌肉注射免疫组基因疫苗表达产物的量与肌肉注射剂量呈现正相关关系。
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