6株生防放线菌的生物学习性及防病抑菌作用研究

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本实验对从土壤中诱捕分离的6 株高拮抗活性的生防放线菌SC1、SC1-1、SE2、A3、A4 以及15-3 的抑菌作用和生物学习性进行了系统的研究,优化了摇瓶发酵条件,并对菌种的复壮、保藏条件进行了探索,希望为新型生防菌剂的开发利用奠定基础。以苹果炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、粉红聚端孢(Trichothecium roseum)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)和西瓜枯萎菌(F. oxysporum f.sp. niveum)4 种常见植物病原菌作为靶标菌进行的皿内拮抗实验结果表明, 6 株生防放线菌均表现很强的拮抗能力;6 株生防放线菌发酵滤液对4 株靶标菌的孢子萌发具有明显地抑制作用。液培条件下的抑菌活性实验结果表明, 6 株生防放线菌都能够不同程度的抑制靶标病原真菌生长,抑制率均超过50%。对苹果采后灰霉病的控制实验以及套袋苹果菌药结合控病试验结果表明,6 株生防放线菌发酵液对苹果灰葡萄孢都具有明显的抑制作用,菌株SC1、A3、SE2 和15-3 的发酵液对苹果灰葡萄孢的控制作用均超过80%,菌株15-3 的菌悬液也具有一定的抑制效果。菌株SC1 能够有效地抑制套袋苹果表面以及苹果叶片表面真菌的生长繁殖,其控制作用随着时间的推移而减弱;菌株15-3 对苹果表面的真菌也有较好的抑制效果。抗药性测定结果表明,除菌株15-3 具有很强的抗药性外,其它5 株生防放线菌对供试的抗生素的抗性有明显的差异,对利福平的抗性最差;在供试杀菌剂中,6 株生防放线菌对腐霉利和三唑酮表现出极高的抗性,但对百菌清较敏感。植株体内以及套袋苹果表面定殖试验结果表明,菌株15-3 在套袋苹果以及苹果叶片上具有很强的定殖能力,套袋苹果表面菌株15-3 的数量随着生长期的推移而呈上升趋势,叶片表面的菌量则逐渐下降。菌株15-3 可在供试作物根部定殖,在黄瓜根部的定殖能力强于在小麦和大麦根部的定殖能力。对作物种子萌发以及幼苗生长的影响的试验结果表明,6 株生防放线菌对4 种作物胚根和胚芽的伸长以及幼苗的生长均没有明显的抑制作用,且菌株15-3 表现出了较强的促生作用。对5 株生防放线菌摇瓶发酵条件进行初步优化,发现各菌株所需培养条件均不同,确定出菌株SC1、SC1-1、SE2、A3 和A4 最适宜的培养基分别为SNB、SYB、SYB、SNB 和DSB,最适初始pH 值分别为7.0、6.0、6.7、6.0、7.0,最佳培养时间分别为48h-72h、72h-96h、48h-72h、72h-96h、48h-72h。菌种复壮结果表明,含有几丁质的土壤基质不仅有利于A3 菌株生长繁殖,而且能够明显提高其几丁质酶的产生能力,从而改善此菌株的抑菌活性。
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