【摘 要】
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目的：建立一种灵敏、快速、特异的检测端粒酶活性的方法,并以此方法检测食管癌病人标本中端粒酶的活性;分析实验测定的结果,研究食管癌与端粒酶的相关关系,为食管癌的预警提供
【出 处】
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中国协和医科大学 中国医学科学院 北京协和医学院 清华大学医学部
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目的：建立一种灵敏、快速、特异的检测端粒酶活性的方法,并以此方法检测食管癌病人标本中端粒酶的活性;分析实验测定的结果,研究食管癌与端粒酶的相关关系,为食管癌的预警提供基础数据.方法：该实验分为两大部份,第一部分中,对几种以PCR为基础的端粒重复序列扩增（TRAP）-银染方法进行了比较试验;先选择了四种银染方法进行了对比实验,使用pBR322/MspIDNA标志物作为样品,进行15﹪聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳完毕后,分别采用不同的银染方法进行银染显色,对凝胶的银染结果进行拍照,结合照片的清晰度以及银染方法本身的简便性和易操作性方面的特点进行比较,造出一种染色效果好、相对简便的银染方法;我们选择了3种TRAP方法进行了的对比实验,使用Hela细胞的端粒酶提取液,分别按三种TRAP的方法进行端粒酶延伸、PCR反应,然后将反应产物作为样品,进行15﹪聚丙烯酰胺凝胶电池,银染显色,比较三种方法的灵敏度以及简便性,选出一种相对较好的方法.第二部分：结合TRAP与银染方法对来自12例食管癌病人的共36份临床病理标本进行了端粒酶活性测定.结合TRAP和银染建立了测定端粒酶的TRAP-银染方法,采用此法测定的36份标本中,12份食管癌组织中9份表现为端粒酶活性阳性;12份癌旁组织中2份标本为阳性结果,12份正常组织全部为端粒酶阴性.x<2>统计检验结果为：癌组织与癌旁组织端粒酶测定结果有显著型差异（P<0.05）;癌组织与正常组织端粒酶测定结果有非常显著型差异（P<0.01）;癌旁组织与正常组织端酶测定阳性率没有显著差异（P>0.05）.
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