高血压病血瘀证患者血清对血管内皮细胞损伤的研究

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目的:观察高血压病血瘀证患者血清对血管内皮细胞活性、形态、DNA及相关功能的影响,探讨上述病理变化的原因及在高血压病、血瘀证发生、发展中的作用。方法:用15%高血压病血瘀证患者血清干预人脐静脉内皮细胞(ECV-304)48h,阳性对照组、阴性对照组分别用同等浓度的高血压病非血瘀证患者、健康人血清干预,空白对照组用不含血清培养基干预。分别检测以下指标:1.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的活性。2.单细胞凝胶电泳(SCGE)技术检测细胞DNA的损伤。3.逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测细胞内皮素(ET)、血管性假血友病因子(vWF)、血栓调节蛋白(TM)mRNA的表达。4.硫代巴比妥酸(TBA)法检测各组细胞释放的丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶法检测释放的超氧化物歧化酶(SOD)。结果:1.与非血瘀证、健康组比较,血瘀证组细胞增殖受到抑制(P<0.05)。2.血瘀证、非血瘀证组细胞DNA呈典型的“彗星”图像,选取能反映细胞DNA损伤的指标进行统计,均说明血瘀证、非血瘀证组细胞有明显DNA损伤,血瘀证组较非血瘀证组细胞DNA损伤严重但差异不明显。3.血瘀证、非血瘀证组细胞ET、vWF、TM mRNA的表达较空白组细胞比较均明显增加(P<0.05),血瘀证组细胞此三个蛋白mRNA的表达较非血瘀证组有增高趋势。4.血瘀证、非血瘀证组细胞释放的MDA明显升高、SOD活力降低,与健康组、空白组比较差异显著(P<0.05),血瘀证组与非血瘀证组细胞间差异不明显。结论:高血压病患者血清作用后的内皮细胞活性降低、发生氧化应激反应、细胞的DNA损伤、内皮细胞损伤标志物ET、vWF、TM的mRNA表达增加,上述病理变化与高血压病的发生、发展有密切联系;血瘀证组上述指标均较非血瘀证组有升高趋势,提示上述病理变化可能在非血瘀证向血瘀证的转化及血瘀证的形成中有重要作用。
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