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母性行为是雌性哺乳动物表现出来的一种高度保守的动机行为。母亲通过为其后代提供营养物质、庇护所、情感慰藉及其他母婴互动来形成母子间的依恋关系,确保后代的生存和发展。全世界范围内,女性在围产期吸烟都仍是一个亟待解决的重大公共卫生问题。母亲围产期吸烟会使后代出现神经发育异常、行为情感障碍等问题的几率大大增加,对后代造成持续的健康风险。多项研究已经证实了,母性行为的完整性会因为围产期药物滥用而受到损害。但关于尼古丁滥用是否会破坏母性行为,至今仍存在争论。有研究发现了尼古丁慢性处理后母亲哺乳行为的减少,但也有研究表明对母性行为没有影响。这可能是由于给药时间、给药方式等的不同。在本研究中我们采用围产期尼古丁慢性皮下注射的方式,结合多重行为测试范式,考察围产期尼古丁慢性给药后不同时期对母鼠母性行为的影响。调控奖赏效应的中脑皮质边缘系统在尼古丁成瘾和母性行为的表达中都有重要的调控作用,且其在成瘾后发生了神经适应性变化,因此推测该系统可能在尼古丁滥用破坏母性行为中发挥着关键作用。中脑皮质边缘系统包括腹侧被盖区（ventral tegmental area,VTA）、伏隔核（nucleus accumbens,NAc）、杏仁核（amygdala）、内侧前额叶皮质（medial prefrontal cortex,m PFC）等脑区。VTA作为多巴胺神经元的起源地,其投射至NAc的多巴胺（dopamine,DA）能神经元在尼古丁成瘾的重要性已被大量研究证实。母婴互动时,可检测到NAc及m PFC中DA释放增加。而分别损毁VTA、NAc、m PFC三个脑区,均会发现母性行为的显著减少。阻断多巴胺D1受体（DRD1）和D2受体（DRD2）,也会使母性护理行为显著衰减。因此我们推测尼古丁滥用可能通过调控中脑皮质边缘多巴胺系统来破坏母性行为,而多巴胺D1/D2受体可能在其中起关键性的作用。五羟色胺（serotonin,5-HT）作为中枢奖赏系统中的另一个重要的神经调质,在成瘾的形成以及母性行为的表达中也有非常重要的作用。我们实验室前期研究中,发现了m PFC和VTA中5-HT2A受体活性的上调,及VTA中5-HT2C受体的激动,均会在一定程度上破坏母性行为。因此我们认为中脑皮质边缘五羟色胺系统中5-HT2A和5-HT2C受体在尼古丁滥用影响母性行为中的作用同样不可忽视。本研究将采用多种母性行为测试范式考察围产期尼古丁处理对母性行为的影响;最后采用分子生物学方法检测m PFC、NAc、VTA、杏仁核这四个脑区中多巴胺D1、D2受体和5-HT2A、5-HT2C受体的基因表达水平,探究尼古丁慢性处理影响母性行为的神经受体机制。研究一采用行为药理学的方法探究围产期尼古丁慢性处理在产后不同时期对母性行为的影响。本研究进行了两个实验,分别考察尼古丁慢性和急性给药对母性行为的影响。实验一在整个妊娠期及产后前三天以尼古丁浓度梯度递增的方式进行皮下注射。在产后3-9天内进行饲养笼内母性行为测试、高架十字迷宫幼崽衔回测试、幼崽偏好测试等行为范式。实验二在整个妊娠期及产后前两天每天进行生理盐水皮下注射。实验组母鼠在产后第3天换用尼古丁注射,浓度与实验一最后一次注射浓度相同,第4天停止给药。行为测试与实验一相同。研究发现:围产期尼古丁慢性处理显著减少了产后第3、4天的弓背哺乳行为和筑巢行为,延长了产后第3天幼崽衔回的潜伏期;在产后5-9天的测试中没有观察到母性行为的显著变化。在尼古丁急性给药实验中没有发现尼古丁处理对母性行为的影响。这些结果表明围产期尼古丁处理在产后戒断短期内会破坏母性行为,而随着戒断时间的增加母性行为逐渐恢复至正常水平。研究二采用行为药理学的方法,探究在不同情境下产后尼古丁短期戒断影响母性行为的心理机制。在围产期尼古丁慢性处理后,产后第4天停止给药后的48小时内母鼠接受了三个行为学测试:实验一在对饲养笼进行改造后进行饲养笼内母性行为测试;实验二在入侵者入侵巢穴情境下及攻击后观测母性攻击行为和母性行为;实验三为高架十字迷宫幼崽衔回测试。研究发现:在母性攻击范式中实验组母鼠表现威胁姿势的总时间减少,舔舐幼崽的总时间时间显著降低;在高架十字迷宫测试中发现了实验组焦虑样行为的增加以及衔回幼崽潜伏期在一定程度上的延缓。以上结果提示尼古丁短期戒断可能通过母性动机或母性情绪等多种心理功能的异常来破坏母性行为。研究三采用实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time,q PCR）的方法检测尼古丁短期戒断时多巴胺D1、D2、5-HT2A和5-HT2C受体的基因表达水平,考察其在母性行为的下调中的作用。本研究分为两个实验,实验一探究尼古丁短期戒断时多巴胺D1、D2受体的基因表达水平;实验二探究5-HT2A和5-HT 2c受体在尼古丁短期戒断时的基因表达水平。研究发现:在尼古丁短期戒断VTA中的DRD1受体m RNA水平显著上调,m PFC中发现5-HT2A的m RNA水平显著上调,NAc中5-HT2A和5-HT2C两种受体m RNA水平均发现了显著上调。以上结果提示了VTA中的DRD1受体及中脑边缘皮层中的5-HT2A和5-HT2C受体在母性行为中的调控作用。综上所述,围产期尼古丁处理在产后短期戒断会通过破坏母性动机、母性情绪从而破坏母性行为,在长期戒断后对母性动机及母性行为没有显著的影响。短期戒断的破坏作用与内侧前额叶中5-HT2A受体及NAc中5-HT2A和5-HT2C受体的上调有关,VTA中更多的DRD1受体的表达也可能在其中发挥着重要作用。该研究可以为吸烟孕产妇提供合适的戒烟治疗方案,改善母性关爱质量、促进后代的健康成长等方面有重要的参考价值。