成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)是成纤维细胞生长因子(FGFs)家族的成员之一。在原肠胚时期和与细胞的早期分化过程中起着重要作用,并与脑、颅面器官、脏器、骨骼、四肢的形成有着重要的关系,是胚胎发育中不可缺少的生长因子之在正常成人体内,FGF8于肾脏、前列腺、睾丸、乳腺、骨髓和外周血白细胞中低水平表达。但在前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌与某些炎症部位FGF8呈现过量表达。进一步研究发现,其对激素依赖性癌症有着促进作用,而FGF8抗体对癌症细胞的发生和生长具有明显的抑制作用。因此,利用其抗体治疗激素依赖性癌症越来越受到人们的关注重组人FGF8b (recombinant human fibroblast growth factor 8 isoform b, rhFGF8b)是将人FGF8b基因经过体外改造克隆后以生物工程菌表达得到的多肽。具有与天然FGF8b相同的分子结构。同时,与从天然动物组织中提取得FGf8b相比,更具有产量高、成本低等优点。本研究目的是构建高效表达重组人细胞成纤维生长因子8b的基因工程菌,为随后的抗体制备做准备。首先由于人FGF8b的基因序列中有大肠杆菌稀有密码子,所以先将FGF8b基因中的密码子的优化成为大肠杆菌偏好密码子,之后进行合成。再将合成的rhFGF8b基因与大肠杆菌表达载体pET3c构建成为原核表达载pET3c-rhFGF8b,并转化入大肠杆菌表达宿主菌BL2l中,利用IPTG进行诱导表达,筛选得出rhFGF8b蛋白高表达大肠杆菌菌株。并通过诱导时机、诱导温度、诱导时间、IPTG浓度等多方面进行了表达条件优化。最后通过肝素亲和层析法纯化获得了rhFGF8b蛋白。结果表明,本研究通过将人FGF8b基因密码子的优化,构建出了PET3c-rhFGF8b质粒,并成功将该质粒其转入到大肠杆菌BL21宿主菌中,成功表达了rhFGF8b蛋白。在进行表达条件优化过程中总结出,最佳诱导条件为在大肠杆菌A600为0.8-1.2之间,IPTG终浓度为0.1mmol·L-1,35℃诱导4小时所获得的rhFGF8b蛋白表达量为最高。之后进行了工程菌的高密度发酵,经肝素亲和层析进行纯化,成功获得了rhFGF8b蛋白。本研究成功获得的rhFGF8b蛋白,一方面能够为进一步开展胚胎学与激素类癌症等研究做基础,另一方面能够为之后作为激素类癌症的诊断试剂盒及治疗用FGF8b的抗体制备做好准备。